實驗原理：細胞中的DNA受1NHC1，60℃水解作用以後，核酸中的嘌呤堿很快*被除掉，使脫氧核糖中潛在的醛基獲得自由狀態。水解後，組織要經水洗再移至希夫（Schiff）試劑中，希夫試劑即同露出來的醛基發生反應，呈現紫紅色。這個(ge) 反應是Feulgen在1942年提出來的，是DNA的一個(ge) 特異性檢查法。水解的時間很重要，因為(wei) 核酸的水解有兩(liang) 個(ge) 過程，*，漂呤堿很快被除掉，脫氧核糖中潛在的醛基顯露出來，第二，組蛋白和核酸愈來愈多地被除掉。在短時間的水解作用以後，*個(ge) 過程占優(you) 勢，這時候用希夫...

本文討論的範圍包括RNA酶保護分析，northernblot，原位雜交，半定量RT-PCR和定量RT-PCR。本文不談具體(ti) protocol，是因為(wei) 各種書(shu) 籍和kit說明書(shu) 上都有，主要說一些原則，而且大部分是失敗和成功的經驗，還有小組討論結果以及各種書(shu) 裏七零八落看的內(nei) 容，希望對大家有用。基因表達的定義(yi) ：說到基因表達，是指RNA，還是蛋白？是指mRNA還是包括風頭正旺的非編碼RNA？mRNA還有不翻譯的RNA呢。應該說轉錄水平指的是RNA水平，而蛋白應該叫翻譯水平？我們(men) 這裏就特指編...

中文名：異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)英文名稱：Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside用途：異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一種作用*的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩定,因此被實驗室廣泛應用。IPTG常用於(yu) 需要誘導β-半乳糖苷酶活性的克隆實驗。它常與(yu) X-Gal或Bluo-Gal結合使用，用於(yu) 重組細菌菌落的藍白篩選，這些菌落可以誘導lac操縱子在大腸杆菌中的表達。IPTG與(yu) lacI阻遏蛋白結合並改變其構象而發揮作用，防止β-半乳糖苷...

一、原理植物激素（planthormone）免疫定量主要有放射免疫分析（RIA）和酶聯吸附免疫分析（ELISA），由於(yu) 前者操作上欠安全等原因，目前常采用後一種類型。在ELISA中，抗原抗體(ti) 反應的檢測依靠酶標記物來實現，常用的酶有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酯酶。酶可直接標記激素分子，稱為(wei) 酶標植物激素，也可標記於(yu) 第二抗體(ti) （識別抗激素抗體(ti) Fc片段的抗體(ti) 或金黃色葡萄球菌A蛋白），稱為(wei) 酶標二抗。這兩(liang) 類標記物分別用於(yu) 固相抗體(ti) 型和固相抗原型ELISA。A.固相抗體(ti) 型ELISA：將抗激素的單克...

在細胞中，蛋白質並不是孤單的個(ge) 體(ti) 。大多數蛋白通過與(yu) 分子伴侶(lv) 或其他蛋白形成複合物而發揮其功能。因此，在了解細胞的生物學特性時，蛋白質相互作用（PPI）研究就成了重要一環。在藥物開發的過程中，這一信息也至關(guan) 重要，有助於(yu) 確認藥物靶點。一提起蛋白質相互作用研究，你的腦海中可能馬上浮現出：酵母雙雜交、免疫共沉澱等技術。的確，這些都是經典方法，可有效檢測體(ti) 內(nei) 體(ti) 外蛋白質相互作用。然而，它們(men) 不能提供動態的蛋白相互作用信息，似乎還缺乏一些說服力。基於(yu) 此，共振能量轉移這種方法受到人們(men) 的青睞。這種...

痛風發作會(hui) 在人體(ti) 關(guan) 節部位引發炎症和劇烈疼痛，但過了一段時間後，炎症通常會(hui) 自動減弱，疼痛感也逐漸消失。這為(wei) 何會(hui) 發生?德國研究人員發現，原因在於(yu) 一種人體(ti) 免疫細胞的“自殺式攻擊”。痛風的病因是體(ti) 內(nei) 嘌呤物質新陳代謝紊亂(luan) ，導致尿酸合成增加、排出減少，造成高尿酸血症。血液中尿酸濃度過高時，尿酸會(hui) 以微小的鈉鹽結晶(俗稱痛風石)形式析出，積累在關(guan) 節、軟骨和腎髒中，引發炎症。德國埃爾朗根大學近日發表研究公報稱，其研究人員發現，人體(ti) 免疫係統的嗜中性粒細胞在抗擊痛風引發的炎症中發揮了關(guan) 鍵作用。實驗...

Dmem(A)細胞培養(yang) 基（粉末型）成分序號化合物名稱含量(mg/L)序號化合物名稱含量(mg/L)1無水氯化鈣.2H2O265.0018L-絲(si) 氨酸42.002硝酸鐵.9H2O0.1019L-蘇氨酸95.003氯化鉀400.0020L-色氨酸16.004無水硫酸鎂97.6721L-酪氨酸72.005氯化鈉6400.0022L-纈氨酸94.006無水磷酸二氫鈉109.0023D-泛酸鈣4.007丁二酸75.0024酒石酸膽堿7.208丁二酸鈉100.0025葉酸4.009L-鹽酸...

Q：westernblot中脫脂奶粉封閉的是哪些蛋白?原理是什麽(me) ?A：脫脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原的蛋白去封閉膜，避免標記抗體(ti) 固定在膜上引起背景增高。Q：請問封閉液和抗體(ti) 稀釋液用BSA和脫脂奶粉有什麽(me) 區別呢?有人跟我說奶粉的封閉效果更好些，但是通常隻能用於(yu) WesterBlot，如果要做elisa或者phagedisplay時候，蛋白鋪板的話，不能使用脫脂奶粉。可是也有人說可以，請問是否有這個(ge) 說法呢?A：所謂封閉是用以減少或消除載體(ti) 上的非特異性結合蛋白的分...

考馬斯亮蘭(lan) G250與(yu) 蛋白質結合，在0－1000ug/ml範圍內(nei) ，於(yu) 波長595nm處的吸光度與(yu) 蛋白質含量成正比，可用於(yu) 蛋白質含量的測定。考馬斯亮蘭(lan) G250與(yu) 蛋白質結合迅速，結合產(chan) 物在室溫下10分鍾內(nei) 較為(wei) 穩定，是一種較好的蛋白質定量測定方法。1.實驗部分1.1儀(yi) 器與(yu) 試劑：LabtechUVPOWER紫外分光光度計；玻璃比色皿一套；考馬斯亮藍G250；牛血清蛋白；超純水。1.2試液的製備：牛血清蛋白標準溶液（1000ug/ml）的製備稱取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中，加...

（一）、儀(yi) 器設備1）18cm不鏽鋼高壓鍋或電爐或醫用微波爐；2）水浴鍋（二）、試劑1）pbs緩衝(chong) 液（pH7.2～7.4）：NaCl137mmol/L，KCl2.7mmol/L，Na2HPO44.3mmol/L，KH2PO41.4mmol/L。2）0.01mol/L檸檬酸鹽緩衝(chong) 液（CB，pH6.0，1000ml）：檸檬酸三鈉3g，檸檬酸0.4g。3）0.5mol/LEDTA緩衝(chong) 液（pH8.0）：700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O，用10mmol/LNaOH調至pH...