尿蛋白定量測試盒檢測原理

尿蛋白定量測試盒檢測原理

一、測定原理：

  在酸性介質中，CBB 與(yu) 蛋白質的 NH3+基團結合引起由棕色到蘭(lan) 色的顏色變化，在 595nm 處有最大吸收峰。

二、試劑組成：（試劑盒有效期 6 個(ge) 月）

試劑一：CBB 試劑 60mL×1 瓶， 4℃保存。用時按 CBB 試劑：蒸餾水=1∶4 比例(即 5 倍稀釋)配製成 CBB 應 用液，現用現配。 

試劑二：524mg/L 蛋白標準液 0.5mL×1 支，4℃可保存 1 個(ge) 月（-20℃冷凍保存，可存放 6 個(ge) 月）。 

三、所需儀(yi) 器及試劑： 

可見光分光光度計及 1cm 光徑比色皿（或酶標儀(yi) （595nm）及 96 孔板），渦旋混勻器，蒸餾水。

四、操作方法：

五、計算公式：

六、注意點： 

1、樣本蛋白濃度過低時可適當加大取樣量（如取樣 0.1 或 0.2mL，同時標準品應稀釋 2 倍或 4 倍後和樣本量體(ti) 積一致，計算時標準品濃度除以相應的稀釋倍數後再代入計算），而 CBB 應用液量不變； 

2、測定管 OD 值過高時（測定 OD 減去空白 OD 後的差值比標準 OD 減空白 OD 的差值的 2 倍還大的）要將樣 本用生理鹽水作一定稀釋後（稀釋後選擇測定 OD 值接近標準 OD 值對應的稀釋倍數）再測； 

3、本試劑盒也可用酶標儀(yi) 來讀數（如在反應液靜置 5 分鍾後從(cong) 每管中各取 0.2mL 到 96 孔板中（注意不要加入 氣泡），595nm 處讀數），計算公式不變。

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