(Ghose法) DNS試劑

(Ghose法) DNS試劑

【產(chan) 品名稱】：DNS試劑(Ghose法)

【產(chan) 品規格】：500ml

【儲(chu) 存條件】：2-8℃

【有效期】：12個(ge) 月

產(chan) 品簡介：

Ghose法DNS試劑。又稱3,5-二硝基水楊酸法或簡稱DNS法,DNS試劑是植物總糖和還原糖檢測(硝基水楊酸法)的成分之一,定量檢測植物組織樣品中的總糖和還原糖的含量。

檢測原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水楊酸被還原為(wei) 棕紅色的氨基化合物。在一定範圍內(nei) ，還原糖的量與(yu) 棕紅色產(chan) 物的顏色深淺程度呈一定比例關(guan) 係。在540nm處測定棕紅色物質的吸光度，該吸光度值與(yu) 還原糖含量呈線性關(guan) 係。

操作步驟(僅(jin) 供參考)：1、 還原糖的提取：①稱取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水衝(chong) 洗研磨器2~3次，洗出液也轉移至該容器。②50℃水浴30min，並不時攪拌，以便還原糖浸出。③將沉澱和浸出液轉移至50ml離心管，4000g離心5min。④留取上清液，向沉澱中加入20ml蒸餾水，混勻，再次4000g離心5min。

⑤留取上清液，將2次獲得的上清液合並，用蒸餾水定容至100ml(提取液)，混勻，作為(wei) 還原糖待測液。2、 總糖的水解和提取：①稱取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水衝(chong) 洗研磨器2~3次，洗出液也轉移至該容器。②向容器中加入10ml 6M鹽酸溶液，攪拌均勻，煮沸30min，並不時攪拌。③取2滴滴加於(yu) 載玻片上，滴加1滴顯色液，檢查水解是否,如已經水解則不顯示藍色。④水解完畢後，冷卻至室溫，加入6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH至7.4左右，用蒸餾水定容至100ml，混勻，4000g離心5min或過濾，獲得上清或濾液。⑤取上清或濾液10ml，用蒸餾水定容至100ml，成稀釋10倍的總糖水解液(提取液)，取1ml總糖水解液，測定其還原糖的含量。

注意事項：1、 該試劑避免反複凍融，以免失效或效率下降，盡量避光保存。2、 稀釋鹽酸和氫氧化鈉溶液時，應小心操作，避免傷(shang) 人。3、 一般市售的濃鹽酸摩爾數約為(wei) 11.6M，應稀釋至6M後使用。4、 待測樣本如不能及時測定，應置於(yu) 2~8℃保存，3天內(nei) 穩定。5、 如果樣品還原糖濃度過高，應用蒸餾水稀釋後重測，結果乘以稀釋倍數。6、 總糖計算公式在測定幹擾雜質很少、還原糖含量相對總糖含量很少時使用,×0.9是為(wei) 了從(cong) 測定出的總糖水解成單糖中，扣除水解時所消耗的水量。

(Ghose法) DNS試劑