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產品分類兔抗綿羊紅細胞抗體(ti) 溶血素貨號:B2880規格:1ml*5支本產(chan) 品僅(jin) 供科研實驗用,不做其它用途!
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兔抗綿羊紅細胞抗體(ti) 溶血素
貨號:B2880
規格:1ml*5支
成分:兔抗綿羊紅細胞溶血素
效價(jia) :1:4000
保存:4-8℃(避光保存)
用途:科研、教學實驗使用,如總補體(ti) 溶血活性(CH50)檢測、補體(ti) 結合實驗(cft)等
產(chan) 品規格:1ml/支
注意事項:請穿戴實驗服及一次性手套操作
血清總補體(ti) 溶血活性(CH50)測定方法
一、原理
利用綿羊細胞與(yu) 相應抗體(ti) (溶血素)結合成的複合物,可激活血清中的補體(ti) ,導致紅細胞溶解,當紅細胞和溶血素量一定時,在規定反應的時間內(nei) ,溶血程度與(yu) 補體(ti) 量及活性呈正相關(guan) 。在接近50%溶血(CH50)時,二者之間近似直線關(guan) 係,故以50%溶血作為(wei) 最敏感的判斷終點。以引起50%溶血所需的最小補體(ti) 量為(wei) 一個(ge) CH50U,可計算出待測血清中總的補體(ti) 溶血活性,以CH50U/ml表示。
本實驗主要反映補體(ti) 經典活化途徑的溶血功能,其結果與(yu) 補體(ti) C1~C9各組成分的量及活性均有關(guan) 。
二、試劑及配製
1.緩衝(chong) -生理鹽水:
(1)貯存液:
Na2HPO4.12H2O 2.85g
KH2PO4 0.27g
NaCl 17.00g
蒸餾水定容至100ml,4℃保存備用
(2)應用液:5ml貯存液加95ml蒸餾水,再加10%硫-酸鎂0.1ml,當日配製,12小時內(nei) 使用。
2.2%綿羊紅細胞:無菌采取綿羊血液,於(yu) 等量Alsever液中可保存3周。用前以緩衝(chong) 液洗3次,並配成2%細胞懸液。必要時可用吸光光度法或細胞計數法使懸液細胞濃度標 準化。
3.溶血素:將綿羊紅細胞溶血素(效價(jia) 1:4000),用應用液做1:2000倍稀釋(即1ml溶血素加1999ml應用液)。
4.待測血清:新鮮血液室溫放置30min,再4℃放置60min,使血-塊收縮,4℃離心(3000r/min)10min,取上清,-20℃保存。
三、操作步驟
試管法(改良Mayer法)
1.致敏羊紅細胞:2%綿羊紅細胞加等量稀釋後的溶血素(1:2000),混勻,置37℃水浴30min。
2.稀釋血清:待測血清0.2ml,加應用液3.8ml,稀釋度為(wei) 1:20。
3.配製溶血標準管:全溶血管:2%綿羊紅細胞2ml加8ml蒸餾水,混勻。50%溶血管:取全溶血管液2ml加緩衝(chong) 液2ml。
4.按表所示,依次加各成分於(yu) 試管中,混勻,置37℃水浴30min
兔抗綿羊紅細胞抗體(ti) 溶血素