耐堿性蛋白A瓊脂糖凝膠

耐堿性蛋白A瓊脂糖凝膠

英文名稱：rat-Protein ABerpharoseFF

貨號：B2831

規格：1ml

1.產(chan) 品介紹

同普通蛋白A瓊脂糖凝膠相比，耐堿蛋白A瓊脂糖凝膠FF大大提高了凝膠的耐堿性，可以使用0.1-0.5MNaOH溶液去除熱源或對凝膠進行清洗。瓊脂糖凝膠骨架上的延伸碳臂和重組耐堿蛋白A上的定向結合位點的設計保證了兩(liang) 者之間的定向牢固鍵合以及耐堿蛋白A同抗體(ti) 間的高效親(qin) 和能力。

2.規格

1ml（預裝柱）、5ml（預裝柱）、10ml（預裝柱）、25ml、100ml、500ml、1L 純化流程

應用舉(ju) 例：

結合緩衝(chong) 液：20mM磷酸緩衝(chong) 液、150mMNaCl、pH7.0

洗脫緩衝(chong) 液：0.1M甘-氨酸，PH3.0或0.1M檸檬酸緩衝(chong) 液，pH 4.0

中和緩衝(chong) 液：1 M Tris-HCl，pH 8.5

1) 1ml耐堿蛋白A瓊脂糖凝膠FF預裝柱用5-10個(ge) 柱床體(ti) 積的蒸餾水洗去保存液。

2)用結合緩衝(chong) 液平衡5-10個(ge) 柱床體(ti) 積。

3)將5ml人多抗血清用結合緩衝(chong) 液稀釋到50ml，0.45μm濾膜過濾上樣。

4)用結合緩衝(chong) 液再洗5-10個(ge) 柱床體(ti) 積。

5)用洗脫緩衝(chong) 液洗脫抗體(ti) ，收集洗脫峰，並用中和緩衝(chong) 液調節其pH至中性。

6)每次使用後依次使用3個(ge) 柱體(ti) 積的結合緩衝(chong) 液，5個(ge) 柱體(ti) 積的去離子水，5個(ge) 柱體(ti) 積的20%的乙醇平衡保存，防止填料被細菌汙染。

7) SDS-PAGE電泳分析。

6.注意事項

1)樣品洗脫後一般pH很低，應立刻用堿性中和緩衝(chong) 液（如1MTris-HCl，pH8.5）將收集到的抗體(ti) 溶液中和到中性，或在收集容器中事先裝5-10%、pH7.5的緩衝(chong) 液（如1MTris-HCl或1M磷酸緩衝(chong) 液），以利於(yu) 維持抗體(ti) 的生物活性，避免抗體(ti) 失活。

2)使用時保證柱子和緩衝(chong) 液的溫度一致，避免柱床內(nei) 產(chan) 生氣泡，影響純化效果。

3)填料再生清洗：隨著一些變性物質的沉澱和蛋白的聚集，往往造成流速和結合載量下降，嚴(yan) 重影響純化效果，這時需要對填料進行再生清洗（如下步驟）：先用3倍柱體(ti) 積的結合緩衝(chong) 液清洗，然後用至少2倍柱體(ti) 的0.1-0.5 M NaOH清洗，接觸時間為(wei) 15 min，最後用5倍柱體(ti) 積的結合液衝(chong) 洗。（注：因0.1–0.5 M NaOH粘度大易造成壓力增加，可進行反向衝(chong) 洗。）

4)本產(chan) 品保存條件：20%乙醇，4-8℃。

耐堿性蛋白A瓊脂糖凝膠