肝素親和柱 Heparin淨化柱

肝素親(qin) 和柱 Heparin淨化柱

貨號：B2804

規格：3ml*10支/套

1. 產(chan) 品介紹

乳鐵蛋白是近年來國內(nei) 外開發研究速度最快的一種營養(yang) 添加劑，由於(yu) 其具有廣譜抗菌、抗病毒感染、調節體(ti) 內(nei) 鐵平衡、調解骨髓細胞的生成、抑製人體(ti) 腫瘤細胞、同多種抗生素及抗真菌製劑協同有效治療疾病等功效，使其產(chan) 品在國內(nei) 外乳製品加工中的應用範圍日益廣泛。

肝素親(qin) 和柱能夠特異性的純化樣品中的乳鐵蛋白，本產(chan) 品采用了柱狀瓊脂糖凝膠作為(wei) 固相載體(ti) ，瓊脂糖凝膠與(yu) 肝素偶聯形成免疫吸附劑，裝柱製成免疫親(qin) 和柱，能夠特異性的純化樣品中的乳鐵蛋白，樣品前處理後，通過免疫親(qin) 和柱淨化，乳鐵蛋白特異性吸附在親(qin) 和柱上，用淋洗液將免疫親(qin) 合柱上的雜質除去，用洗脫液通過分離柱，將乳鐵蛋白親(qin) 和柱上分離下來，最後，將洗脫液注入HPLC或LC-MS進行測定。

2. 用途

適用於(yu) 乳、乳粉等食品中乳鐵蛋白含量測定；樣品中乳鐵蛋白的淨化，提取等。操作流程

結合緩衝(chong) 液：50 mM磷酸鹽緩衝(chong) 液、pH8.0左右

洗脫緩衝(chong) 液：50 mM磷酸鹽緩衝(chong) 液，2 M NaCl，pH8.0 左右

（1）樣品處理：

（注：適當調節樣品稱取量，使樣品中乳鐵蛋白含量應控製在3mg以內(nei) 。）

①乳粉：精確稱取 2g樣品，置於(yu) 玻璃燒杯中，加入已預熱至40 ℃左右（不可超過50℃）的結合緩衝(chong) 液35 mL ，用玻璃棒攪拌使其溶解均勻。將其轉移至50 mL 容量瓶中，用少量的結合緩衝(chong) 液分次洗滌燒杯和玻璃棒，洗滌液一並移入容量瓶中，用結合緩衝(chong) 液定容至50ml，混勻，倒入50 mL離心管中，在4℃條件下離心（5000r、10min，棄掉上層油脂，底層沉澱，取中間層）或微纖維過濾方式去除油脂和雜質，準確吸取10 mL作為(wei) 樣品液。

②奶液：稱取適量樣品（以不超過3mg乳鐵蛋白載量為(wei) 原則，例如：普通牛奶中乳鐵蛋白參考含量小於(yu) 0.5mg/g，建議稱量10-20g、牛初乳中乳鐵蛋白參考含量1-2mg/g，建議稱量2-5g），置於(yu) 50mL容量瓶中，用結合緩衝(chong) 液定容至50ml，混勻，倒入50 mL離心管中，在4℃條件下離心（5000r、10min，棄掉上層油脂，底層沉澱，取中間層）或微纖維過濾方式去除油脂和雜質，準確吸取10 mL作為(wei) 樣品液。

（2）柱子預處理：取出肝素親(qin) 和柱,恢複至室溫（22-25℃），將上端塞子取出，打開下端堵頭，將柱內(nei) 保存液流掉至高於(yu) 凝膠上界麵3-5mm處，加入總體(ti) 積10ml的結合緩衝(chong) 液平衡柱子（柱子不要走幹）。

（3）加樣：加入處理好的樣品10ml，以流速為(wei) 1-2滴/秒上樣，直至樣品全部通過親(qin) 和柱至凝膠上界麵（柱子不要走幹）。

（4）淋洗：加入10mL結合緩衝(chong) 液淋洗柱子，除去雜質，適當給一些壓力，調節流速為(wei) 1-2滴/秒，直至樣品全部通過肝素親(qin) 和柱，並排幹。

（5）洗脫：加入4ml洗脫緩衝(chong) 液，調節流速為(wei) 1-2秒每滴，緩慢洗脫並排幹，收集全部洗脫液，以洗脫緩衝(chong) 液定容至4ml，即為(wei) 淨化後樣品。

（6）檢測：淨化後樣品用質譜，高效液相、熒光等方法進行檢測。

肝素親(qin) 和柱 Heparin淨化柱