苯甲脒瓊脂糖凝膠FF

苯甲脒瓊脂糖凝膠FF

英文名稱：Benzamidine-Berpharose FF

貨號：B2782

規格：1ml

1.產(chan) 品介紹

   苯甲脒-瓊脂糖凝膠FF是一種將苯甲脒鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親(qin) 和層析分離介質。苯甲脒類物質是絲(si) -氨酸蛋白酶的廣譜抑製劑，該產(chan) 品保留了瓊脂糖極-好的親(qin) 水性及大網架結構，與(yu) 生物活性大分子有很好的相容性，主要用於(yu) 純化胰蛋-白酶、尿激-酶和激肽-釋放酶等絲(si) -氨酸蛋白酶，可以從(cong) 血清、細胞上清液和菌體(ti) 裂解液中一步純化樣品。

2.規格

1ml（預裝柱）、5ml（預裝柱）、10ml（預裝柱）、20ml、100ml、500ml、1L 純化流程

應用舉(ju) 例：

平衡緩衝(chong) 液：50 mM Tris-HCl，0.5M NaCl，pH7.4

結合緩衝(chong) 液：50 mM Tris-HCl，0.5M NaCl，pH7.4

洗脫緩衝(chong) 液：10 mM HCl，0.5M NaCl，pH2.0 或50mM甘-氨酸，pH3.0

中和液: 1M Tris，pH8.5

競爭(zheng) 性洗脫液: 50mM Tris-HCl，20mM 4-氨基本甲脒0.5M NaCl，pH7.4

平衡：用3-5個(ge) 柱體(ti) 積的平衡緩衝(chong) 溶液進行平衡，觀察檢測器的變化，直到電導率、   pH值等參數不變。

上樣：樣品的預處理，樣品需至少用0.45μm濾膜過濾，在上樣，以免堵塞層析柱。

上樣量根據樣品的性質和層析介質的量進行選擇，也可通過線性實驗找到最佳上樣量。

淋洗：用5-10個(ge) 柱體(ti) 積的平衡緩衝(chong) 液進行淋洗，觀察檢測器的變化，直到電導率、pH值等參數基本不變。

（4）洗脫：使用 5-10 倍柱體(ti) 積的洗脫液，收集洗脫峰（部分洗脫方式需中和液中和）。

（5）清洗保存：依次使用 3 倍柱體(ti) 積的平衡緩衝(chong) 液液和 5 倍柱體(ti) 積的去離子水平衡填料，然後保存在等體(ti) 積的保護液中，置於(yu) 4-8 ℃保存。

5.在位清洗(CIP)：

填料可以重複使用無需再生，但隨著非特異性結合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和結合載量都下降，這時可按照下麵方法對樹脂進行清洗。

（1）去除一些沉澱或變性物質：用 2 倍柱體(ti) 積的6M鹽酸胍或8M尿素溶液進行清洗，然後立即用5倍柱體(ti) 積的去離子水清洗。

（2）去除一些疏水性吸附造成的非特異性吸附物質：用 3-4 倍柱體(ti) 積的70%乙醇或2倍體(ti) 積的1% Triton X-100 清洗，然後立即用5倍柱體(ti) 積的去離子水清洗。

（3）去除一些離子鍵結合物質：用 3-4 倍柱體(ti) 積的2M NaCl清洗，然後立即用5倍柱體(ti) 積的去離子水清洗。

注意事項：

（1）使用時保證柱子和緩衝(chong) 液的溫度一致，避免柱床內(nei) 產(chan) 生氣泡，影響純化效果。

（2）本產(chan) 品保存條件為(wei) 50mM NaAc，pH4.0，20%乙醇，4-8℃。

（3）運輸：4-25℃，常，,避光。

（4）僅(jin) 供科研實驗使用。

苯甲脒瓊脂糖凝膠FF