鏈黴親和素瓊脂糖凝膠FF

鏈黴親(qin) 和素瓊脂糖凝膠FF

英文名稱：Streptavidin Berpharose FF

貨號：B2384

1.產(chan) 品介紹

鏈黴親(qin) 和素瓊脂糖凝膠FF（Streptavidin Berpharose FF）是一種將鏈黴親(qin) 和素（Streptavidin）鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的親(qin) 和層析分離介質，利用生物-素與(yu) 鏈黴親(qin) 和素配體(ti) 之間的相互作用分離純化生物-素或生物-素化的抗原、抗體(ti) 、核酸等物質。

鏈黴親(qin) 和素與(yu) 生物之間的親(qin) 和力很強，需要在變性條件下洗脫，這個(ge) 特性可用於(yu) 抗原與(yu) 抗體(ti) 的分離，如將生物-素化的抗體(ti) 結合在凝膠上，然後利用抗原抗體(ti) 的親(qin) 和特性純化無生物-素化的抗原，抗原洗脫時抗體(ti) 不會(hui) 被洗脫。鏈黴親(qin) 和素對亞(ya) 氨基生物-素的親(qin) 和力相對較弱，可以在pH9.5-11.0結合，pH4.0時洗脫，不需要使用變性劑所以能更好的保持親(qin) 和素偶聯物的活性。                   

2.規格：1ml（預裝柱）、5ml（預裝柱）、10ml（預裝柱）、20ml、100ml、500ml

儲(chu) 存溫度：4-8℃

3.純化流程

①緩衝(chong) 液:

（1）純化生物-素或生物-素化物質

結合緩衝(chong) 液：20mM NaH2PO4, 150mM NaCl，pH7.4

洗脫緩衝(chong) 液：8M鹽酸胍，pH1.5

（2）純化2-亞(ya) 氨基生物-素或2-亞(ya) 氨基生物-素標記的物質

結合緩衝(chong) 液：50mM碳酸銨，500mM NaCl，pH10.0

洗脫緩衝(chong) 液：50mM乙酸銨，500mM NaCl，pH4.0

（3）純化抗原或抗體(ti)

結合緩衝(chong) 液：20mM NaH2PO4，150mM NaCl，pH7.4

洗脫緩衝(chong) 液：100mM甘氨-酸-鹽酸，pH3.0

注：

用於(yu) 生物-素化的抗體(ti) 純化未生物-素化的抗原（或生物-素化的抗原純化未生物-素化的抗體(ti) ）有2種方法，①可先在遊離狀態下抗原與(yu) 抗體(ti) 結合，然後當樣品純化即可；②也可以將生物-素化的抗體(ti) （或抗原）先結合柱上，然後對應的未生物-素化的抗原（或抗體(ti) ）當樣品純化。

②樣品準備

上柱的樣品應盡量保持與(yu) 結合緩衝(chong) 液一致。通常可用透析、超濾、稀釋等方法處理樣品。並且上柱前應過0.45μm濾膜或高速離心去除不溶物。

③樣品純化

（1）取適量的鏈黴親(qin) 和素瓊脂糖凝膠FF裝入合適的層析柱中，用結合緩衝(chong) 液平衡5個(ge) 柱體(ti) 積，建議流速為(wei) 100cm/h。

（2）將準備好的樣品緩慢上柱，為(wei) 保證樣品與(yu) 鏈黴親(qin) 和素充分結合，應控製好上樣流速，建議流速為(wei) 15-50cm/h。

（3）上樣後用結合緩衝(chong) 液平衡10個(ge) 柱體(ti) 積以上，或平衡至基線，洗去雜質，推薦流速為(wei) 100cm/h。

（4）用洗脫緩衝(chong) 液洗10-20個(ge) 柱體(ti) 積，建議流速為(wei) 100cm/h，收集的洗脫液應立即調節pH至穩定範圍，並根據需要置換緩衝(chong) 液。

（5）洗脫目的蛋白後的柱子應立即用中性的結合緩衝(chong) 液平衡，並用20%乙醇保存柱子，或進行下一次純化。

6.注意事項：

1)使用時保證柱子和緩衝(chong) 液的溫度一致，避免柱床內(nei) 產(chan) 生氣泡，影響純化效果。

2)去除一些沉澱或變性物質，建議使用下麵的方法用2倍柱體(ti) 積的0.1M NaOH或6M鹽酸胍或8M尿素溶液進行清洗，然後立即用5倍柱體(ti) 積的PBS，pH7.4清洗。去除一些疏水性吸附造成的非特異性吸附物質3-4倍柱體(ti) 積70%乙醇或2倍柱體(ti) 積的1% TritonX-100清洗，然後立即用5倍柱體(ti) 積的PBS，pH 7.4清洗。

3)本產(chan) 品保存條件為(wei) 20%乙醇，4~8℃。

4) 2-25℃,常壓,避光運輸。

5)僅(jin) 供科研實驗使用。