TTC染色實驗代測

TTC染色實驗代測

TTC染色實驗介紹：

TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感複合物，1894年*合成用來檢測種子的生存能力，1958年開始用來染色檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結構酶係統的質子受體(ti) ，與(yu) 正常組織中的脫氫酶反應而呈紅色，而缺血組織內(nei) 脫氫酶活性下降，不能反應，故不會(hui) 產(chan) 生變化呈蒼白

TTC染色實驗步驟（僅(jin) 供參考）：

1、動物麻醉後立即取材，冷凍PBS從(cong) 左心室灌注，整個(ge) 灌注5分鍾內(nei) 必須完成；

2、入-20℃冰箱中速凍20-30min，便於(yu) 切片；

3、用手術-刀片或是刮胡刀片切片，厚度2-3mm為(wei) 宜；

4、將切片置於(yu) TTC孵育液中，放入37℃溫箱（不得高於(yu) 40℃）或是水浴鍋中避光孵育15-30min，隨時觀察，間隔數分鍾翻動組織，使其均勻接觸到染色液；

5、組織成色後，加入固定液終止反應及保存組織，24h後拍照。

染色結果：正常組織呈紅色，梗死區呈蒼白色。

注意事項：

1、標本越新鮮越好，動物麻醉後取材需迅速，勿固定，刀片宜薄而鋒利，在冰箱中速凍的時間以能順利切片為(wei) 宜，保持切片平整；

2、孵育液提前30min入37℃中水浴或是溫箱中加溫；

3、染色後的標本浸存於(yu) 10%中性甲醛或是4%多聚甲醛中，染色結果能保存數月，在陽光下易褪色；

4、TTC染色液避光4℃可保存數月，可重複利用2-3次。

TTC染色實驗代測