普魯士藍染色實驗代測

普魯士藍染色實驗代測

普魯士藍染色簡介：

在酸性條件下，切片內(nei) 的高鐵鹽與(yu) 亞(ya) 鐵作用生成亞(ya) 鐵氰化鐵（普魯士藍反應）。

鐵反應是用來鑒別組織或細胞內(nei) 出現的黃棕色色素是屬於(yu) 哪一種色素，入黑色素、脂褐素、甲醛色素還是含鐵血黃素。

染色步驟（僅(jin) 供參考）：

1、石蠟切片脫蠟至水；

2、蒸餾水洗兩(liang) 次；

3、取等量2%亞(ya) 鐵氫化鉀和2%鹽酸混合，染色30~45min；

4、蒸餾水洗，0.1%核固紅複染3min（染液用一段時間後調整為(wei) 5min）；

5、無水乙醇脫水（兩(liang) 缸各5分鍾）；

6、正丁醇30s；

7、二甲苯透明（兩(liang) 缸各5min）， 中性樹膠封片（封片過程中保證組織上的二甲苯不能幹，否則在高倍顯微鏡下觀察易出現小水珠結晶）。

染色結果：

含鐵血黃素呈藍色，胞核呈紅色。

注意事項：

1、組織應采用緩衝(chong) 中性甲醛液固定，若用一般的甲醛液，則應作短時間固定後即包埋切片，經甲醛液固定的組織反應不良。

2、鹽酸以分析純較好，因粗製鹽酸內(nei) 含有較多的鐵，可導致假陽性。

3、在操作過程中容器要幹淨，避免使用鐵製工具（可用不繡鋼製工具）。

4、鐵反應前的各步驟以蒸餾水衝(chong) 洗，以防自來水內(nei) 的鐵離子與(yu) 組織內(nei) 的鈣鹽結合產(chan) 生假陽性反應。

5、製作對照片時，取另一張相同連續切片脫蠟至水，置入5%的草酸中作用2~6小時，即可將含鐵血黃素溶去，再染普魯士藍，鐵反應陰性。

普魯士藍染色實驗代測