鐵離子比色法檢測試劑盒

所有產(chan) 品僅(jin) 供科研使用，不能用於(yu) 食用和醫療等

產(chan) 品名稱：鐵離子比色法檢測試劑盒

產(chan) 品貨號：XFP10451

產(chan) 品規格：100T

儲(chu) 存條件：4℃保存

細胞鐵離子檢測試劑盒可用於(yu) 培養(yang) 細胞中鐵離子定量檢測。本試劑盒采用亞(ya) 鐵嗪比色法可以定量細胞鐵離子，線性範圍5~300uM。產(chan) 品包括標準品和空白對照，本試劑盒可進行100個(ge) 樣品的檢測。鐵是人體(ti) 必需的元素之一，對人體(ti) 的新陳代謝和身體(ti) 健康具有重要作用，血液中鐵的含量不足，就會(hui) 造成缺鐵性貧血。鐵存在於(yu) 人體(ti) 所有的細胞內(nei) ，各組織、器官包括各內(nei) 分泌腺都含有鐵。肝髒、脾髒和肺組織內(nei) 含量較為(wei) 豐(feng) 富。成人體(ti) 內(nei) 含鐵3～5克，大部分都以蛋白質複合物形式存在，極少部分以離子的形態存在。

檢測原理：

鐵與(yu) 蛋白結合成複合物，在酸性介質中鐵從(cong) 複合物中解離出來，再被還原劑還原成二價(jia) 鐵， 並與(yu) 亞(ya) 鐵嗪生成紫紅色化合物，在 540-580nm 處可比色測定。

產(chan) 品組成：

 A. 細胞裂解液： 20 ml

B. 緩衝(chong) 液： 5ml

C. 檢測劑： 3ml

D. 標準品： 1ml

E. 稀釋用液： 20ml 

實驗步驟：

1.  樣品準備（以24孔板為(wei) 例）：

將含鐵元素DMEM培養(yang) 過的細胞用冷的PBS 2ml洗兩(liang) 遍，將PBS吸棄（若不馬上檢測可將其凍存於(yu) -20℃）。200ul/孔裂解液裂解細胞，置於(yu) 搖床裂解2h。

2. 標準品的稀釋：用試劑盒提供的稀釋用液將3mM 的標準品母液稀釋為(wei) ：300 uM、150uM、75uM、37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。注意倍比稀釋並設置0濃度對照反應管。

3.  將緩衝(chong) 液與(yu) 4.5%高錳-酸鉀溶液按1:1混勻，稱為(wei) 混液A。 注意：用戶自備4.5%高錳-酸鉀溶液 5ml。

4.  參考下表使用1.5ml離心管，設置空白對照管、標準品管和樣品管。如果樣品中的鐵元素含量過高，用裂解液適當稀釋後再進行測定。

                           空白對照          稀釋後的標準品    裂解的樣品

稀釋用液                    100μl               － 

混液A                         100μl             100μl                    100μl

樣品                             －                   －                        100μl

標準品工作液               －                   100μl                     －

5.  混勻，60℃ 孵育1h。

6.  冷卻至室溫，將管蓋與(yu) 管壁上的液滴離心入管底。

7.  加入30ul 鐵離子檢測劑，混勻，室溫孵育，30min。

8. 取200ul 於(yu) 96孔板，在550nm測定吸光度。如果不能測定550nm，也可以在540nm~580nm範圍內(nei) 檢測。

9.  繪製標準曲線並計算鐵離子濃度。

 本產(chan) 品僅(jin) 供科研實驗用，不做其它用途！

鐵離子比色法檢測試劑盒