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甲胎蛋白(AFP)單克隆 標記抗體(ti)
抗體(ti) 選擇與(yu) 使用過程中,多少還會(hui) 遇到一些意想不到的事情。有些細節,還是需要多注意一些。如在選擇做阻斷或中和實驗時,有時需要將抗體(ti) 加到細胞培養(yang) 液中,這是需要注意抗體(ti) 是否含有疊氮鈉。如果是大包裝的抗體(ti) ,進行分裝是比較節約的方式,如果是高效價(jia) 的,可以配成母液再分裝。抗體(ti) 的短時間運輸,用普通冰塊保持溫度是可以滿足要求的。
另外不要糾結於(yu) WB 過程中分子量的問題。很多時候,我們(men) 看到同樣的抗體(ti) ,不同的品牌,甚至同一品牌不同的貨號,標注的分子量都不一樣。其實可能隻是生物試劑商隻檢測時使用了不同的種屬不同的樣品類型,或是參照了不同的文獻,對使用者來說,同樣的樣品,不管使用哪個(ge) 品牌的,隻要抗體(ti) 是對的,目的條帶隻會(hui) 出現在相同的位置。關(guan) 於(yu) 分子量的問題,一般不建議看產(chan) 品說明,WB 中條帶的位置由樣品決(jue) 定,並不會(hui) 因為(wei) 抗體(ti) 不同而不同。所以在檢測蛋白之前,我們(men) 可以通過數據庫或參考文獻,對將要檢測的蛋白做個(ge) 比較全麵的了解,包括其可能剪切與(yu) 修飾的情況、表型的情況等。在第一次使用一個(ge) 新的抗體(ti) 時,不要根據分子量橫向剪膜,可以保留幾個(ge) 全泳道,看看條帶位置或分布的情況。
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