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ST2單克隆 包被抗體

ST2單克隆 包被抗體(ti)
ST2有兩(liang) 種主要的亞(ya) 型:①跨膜型ST2(ST2L),具有跨膜結構,含有跨膜片段和Toll/IL-1TR受體(ti) 胞內(nei) 結構域;②可溶型ST2(sST2),無跨膜結構,可分泌到細胞外。

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ST2單克隆 包被抗體(ti)

目前使用抗體(ti) 的實驗方法有很多,不同的使用方法過程中,因為(wei) 對蛋白樣品的處理方式不一樣,蛋白的含量有差異,對抗體(ti) 的識別表位和效價(jia) 要求都是不一樣的。具體(ti) 的根據說明書(shu) 注明的產(chan) 品應用方法進行選擇。如果針對具體(ti) 的實驗方法沒有找到合適的抗體(ti) 的,可以結合蛋白序列分析和抗體(ti) 的抗原信息,選擇盡可能有效果的抗體(ti) 。

 一般基於(yu) 實驗操作的實驗方法不會(hui) 使用帶有標記的一抗,比如 WB、IHC 等,都是通過二抗類的試劑標記達到結果呈現的目的。但是基於(yu) 儀(yi) 器分析的一些實驗,可能就會(hui) 使用到直接標記的一抗,比如流式實驗。那麽(me) 需要了解到自己將要使用的儀(yi) 器能檢測到的熒光範圍,針對不通的參數要求選擇對應的標記物。在免疫熒光雙標實驗中,需要選配不同的熒光標記物。有人認為(wei) 單抗比多抗好,其實這並不是一個(ge) 嚴(yan) 謹的觀點,隻能說在可能性上單抗的特異性更好一些,而多抗的親(qin) 和力會(hui) 優(you) 於(yu) 單抗,並且特異性並不一定就遜於(yu) 單抗,主要看抗原的設計水平。目前商品化抗體(ti) 裏單抗主要是鼠單抗、兔單抗,多抗主要是兔多抗、山羊多抗等,其他種屬來源抗體(ti) 較少。不建議糾結於(yu) 單抗好還是多抗好,能做出實驗的抗體(ti) 就是好抗體(ti) 。

在選擇上一般建議實驗種屬和抗體(ti) 種屬親(qin) 緣性越遠越好,不宜同源。抗體(ti) 不同種屬會(hui) 要影響接下來二抗的選配。特別是在免疫熒光雙標實驗中,需要在區別於(yu) 實驗種屬的基礎上,區分開兩(liang) 個(ge) 指標的抗體(ti) 種屬來源,以便於(yu) 二抗區別識別。

抗體(ti) 選擇與(yu) 使用過程中,多少還會(hui) 遇到一些意想不到的事情。有些細節,還是需要多注意一些。如在選擇做阻斷或中和實驗時,有時需要將抗體(ti) 加到細胞培養(yang) 液中,這是需要注意抗體(ti) 是否含有疊氮鈉。如果是大包裝的抗體(ti) ,進行分裝是比較節約的方式,如果是高效價(jia) 的,可以配成母液再分裝。抗體(ti) 的短時間運輸,用普通冰塊保持溫度是可以滿足要求的。

另外不要糾結於(yu) WB 過程中分子量的問題。很多時候,我們(men) 看到同樣的抗體(ti) ,不同的品牌,甚至同一品牌不同的貨號,標注的分子量都不一樣。其實可能隻是生物試劑商隻檢測時使用了不同的種屬不同的樣品類型,或是參照了不同的文獻,對使用者來說,同樣的樣品,不管使用哪個(ge) 品牌的,隻要抗體(ti) 是對的,目的條帶隻會(hui) 出現在相同的位置。關(guan) 於(yu) 分子量的問題,一般不建議看產(chan) 品說明,WB 中條帶的位置由樣品決(jue) 定,並不會(hui) 因為(wei) 抗體(ti) 不同而不同。所以在檢測蛋白之前,我們(men) 可以通過數據庫或參考文獻,對將要檢測的蛋白做個(ge) 比較全麵的了解,包括其可能剪切與(yu) 修飾的情況、表型的情況等。在第一次使用一個(ge) 新的抗體(ti) 時,不要根據分子量橫向剪膜,可以保留幾個(ge) 全泳道,看看條帶位置或分布的情況。

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