C肽放射免疫實驗代測

所有產(chan) 品僅(jin) 供科研使用，不能用於(yu) 食用和醫療等

C肽放射免疫實驗代測

通用名：碘[ 125I]人 C 肽放射免疫-分析藥盒

漢語拚音：Dian [ 125I] Ren C-tai Fangshemianyifenxi Yaohe

英文名：Iodine [ 125I] Human C–peptide Radioimmunoassay Kit

簡稱：碘[ 125I]- C-P 放免藥盒 [使用目的] 用於(yu) 科研血清樣本中 C 肽(C-P)的定量測定

[用途] 1) 指導胰島素治療，對於(yu) 胰島素治療的樣本，C 肽測定可以確定是否繼續使用胰島素治 療，還是用口服降糖藥或飲食治療。C 肽的測定值對糖尿病的治療具有重要意義(yi) 。 2) 對低血糖綜合症的診斷。 3) 對胰島移植和胰腺移植的樣本，C 肽測定可以了解移植是否存活和 B 細胞的功能。 4) 同時測定 C 肽和胰島素可了解肝病的變化，如肝硬化時，外周血 C 肽/胰島素的比值下 降。 5) 對胰島或胰腺腫瘤-治療後複發和功能的診斷。

[試驗原理] 本藥盒采用競爭(zheng) 放射免疫分析法，通過二抗沉澱抗原-抗體(ti) 免疫複合物來測定血清中 C 肽的含量，待測血清、標準品中的 C 肽和 125I-C–P 與(yu) 有*的抗體(ti) 競爭(zheng) 結合。125I-C–P 一 部分與(yu) 抗體(ti) 結合為(wei) 複合物，另一部分遊離。加入分離試劑，離心使複合物部分沉澱，與(yu) 遊離 部分分離，棄去上清液，測定沉澱物的放射性計數。待測血清和標準中的 C 肽含量與(yu) 與(yu) 複合 物的放射性強度呈負相關(guan) ，用一係列不同濃度的 C 肽作標準，可獲得標準曲線，從(cong) 標準曲線 上可查出血清中 C 肽的含量。

[儀(yi) 器] 1、 γ－計數器 2、 低溫離心機 3、 恒溫水浴箱 [樣本要求] 110 微升科研血清樣本。 采靜脈血 5ml 於(yu) 塑料試管中，靜置使其凝固後，1500 轉／分離心，取其上清液，放置玻 璃瓶中。如果樣本不立即使用，可在-18℃~-25℃儲(chu) 存 6 個(ge) 月。 嚴(yan) 重溶血、高濃度的脂類、膽-紅素對測定結果有影響。

[注意事項] 1) 收到分析試劑盒後，盡快存放在 2 – 8℃。 2) 由於(yu) C 肽在溶液狀態下極不穩定，所以先溶解標記物、抗體(ti) ，待一切準備工作完畢後， 後溶解標準品。如果分析試劑盒一次用不完，要做若幹次，那麽(me) 把標準品溶解後盡快 分裝成若幹份，並立即存放在–20℃保存，避免反複凍融。C 肽標記物的分裝、使用、 保存同標準品程序，避免反複凍融。 3) 在加分離試劑前，將分離試劑搖勻。 4) 分析試管放在 4℃溫育時，好套上塑料袋，避免蒸發，保持一定的反應體(ti) 積。

[實驗方法] 1、 將實驗所需試劑及樣本放置室溫，凍幹品按操作要求進行溶解,平衡至少 30 分鍾 以上才可進行操作； 2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進行編號，所有實驗均做雙管重複； 3、 每個(ge) NSB 管加入 200µl 溫育液，每個(ge) 標準品“0"管 加入 100µl 溫育液； 4、 取每個(ge) 濃度的標準品（A~F）、質控血清和樣本 100µl 加入相應編號的試管中； 5、 每管均各加入 100µl 標記物工作液； 6、 除 T、NSB 管外，每管均各加入 100µl 抗體(ti) 工作液，充分混勻； 7、 4℃溫育 24 小時； 8、 每管均各加入 500µl 分離劑後，充分混勻； 9、 室溫放置 15 分鍾後，離心 3500 轉／分，20 分鍾後，吸去或傾(qing) 倒掉上清液； 10、 用 γ-計數器測定每管 1 分鍾的放射性強度計數； 11、 從(cong) 標準曲線上讀取樣本及質控血清的濃度。

[實驗過程中應注意] 1、 γ-計數器本底計數應≤100CPM/分，效率應≥75％； 2、 加入放射性標記物時，應做好防護、小心謹慎，以避免造成放射性汙染； 3、 如果某一個(ge) 樣本的測定值高於(yu) 高濃度的標準品濃度，用零標準品以 1：2 或 1： 4 的比例稀釋樣本後重新測試，測試結果乘以相應的稀釋倍數。

[質量控製] 每次實驗操作應至少采用兩(liang) 個(ge) 濃度的質控血清進行質量控製，以確保每次實驗測定結果 的可靠性。 1、 質控血清的平均值應在允許範圍內(nei) ； 2、 曲線方程應采用佳擬合方式； 3、 重複樣本的測定結果相差在 15％以內(nei) 。 如不能同時滿足以上條件，則此次試驗結果無效，全部試驗需重新進行。

[測定結果的計算] 1、 計算標準品（A~F）、質控品和樣品與(yu) 標準品 0 的比值（B/B0）; 2、 劑量-反應曲線按“對數劑量-結合率對數"（Log(dose-Log(B/ B0))數學模型或 四參數數學模型擬合，通過每個(ge) 標準品的 B/B0和其濃度建立標準曲線； 3、 從(cong) 標準曲線上查出樣本的濃度值，B/B0不在標準曲線之內(nei) 的樣本及其濃度

[實驗的局限性] 1、 本品僅(jin) 供體(ti) 外診斷使用，隻能用於(yu) 科研血清樣本的測定而不能用於(yu) 其他體(ti) 液樣本； 2、 通過其它方法得到的 C-P 值與(yu) 本品測定結果不具有直接的可比性；

C肽放射免疫實驗代測