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冷多夫(Randoph)固定液 提供優(you) 惠高品質試劑
產(chan) 品名稱： 冷多夫(Randoph)固定液
規格：2×100ml
用途：該固定液多用於(yu) 一般植物組織的固定，尤其適用於(yu) 固定植物病害組織、植物根尖、花藥、子房等，能將細胞有絲(si) 分裂時的染色體(ti) 、紡錘絲(si) 等顯示出來。
注意事項：冷多夫(Randoph)固定液又稱為(wei) 改良拉瓦興(xing) 固定液，為(wei) 改良的鉻酸-醋酸-福爾馬林固定液(又稱拉瓦興(xing) 固定液，Navaschin固定液)，主要由鉻酸、醋酸、甲醛等組成
儲(chu) 存條件：室溫,避光,12個(ge) 月
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載體(ti) 和目的基因的切斷(切):通常采用限製性核酸內(nei) 切酶(restriction endonuclease),簡稱限製酶,分別對載體(ti) DNA和目的基因進行切斷,以便於(yu) 重組。能夠識別特定的堿基順序並在特定的位點降解核酸的核酸內(nei) 切酶稱為(wei) 限製酶。限製酶所識別的順序往往為(wei) 4-8個(ge) 堿基對,且有回文結構。由限製酶切斷後的末端可形成平端、3'-突出粘性末端和5'-突出粘性末端三種情況。形成粘性末端(cohesive end)者較有利於(yu) 載體(ti) DNA和目的基因的重組。
載體(ti) 和目的基因的重組(接):即將帶有切口的載體(ti) 與(yu) 所獲得的目的基因連接起來,得到重新組合後的DNA分子。
⑴粘性末端連接法:載體(ti) 與(yu) 目的基因通過粘性末端進行互補粘合,再加入DNA連接酶,即可封閉其缺口,得到重組體(ti) 。
⑵人工接尾法:即同聚物加尾連接法。在末端核苷酸轉移酶的催化下,將脫氧核糖核苷酸添加於(yu) 載體(ti) 或目的基因的3'-端,如載體(ti) 上添加一段polyG,則可在目的基因上添加一段polyC,通過堿基互補進行粘合後,再由DNA連接酶連接。
⑶人工接頭連接法:將人工連接器(即一段含有多種限製酶切點的DNA片段)連接到載體(ti) 和目的基因上,即有可能使用同一種限製酶對載體(ti) 和目的基因進行切斷,得到可以互補的粘性末端。
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