低滲鹽溶液 提供優惠高品質試劑

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低滲鹽溶液(0.075mol/LKCl) 提供優(you) 惠高品質試劑
產(chan) 品名稱： 低滲鹽溶液(0.075mol/LKCl)
規格：500ml
用途：
注意事項：由氯化甲等組成。
儲(chu) 存條件：室溫,12個(ge) 月
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鏈反應(polymerase chain reaction, P CR)技術,在體(ti) 外合成目的基因。重組DNA技術:
重組DNA技術又稱為(wei) 基因工程(genetic engineering)或分子克隆(molecular cloning),是指采用人工方法將不同來源的DNA進行重組,並將重組後的DNA引入宿主細胞中進行增殖或表達的過程。
1.載體(ti) 和目的基因的分離(分):對載體(ti) DNA和目的基因分別進行分離純化,得到其純品。
⑴載體(ti) :常用的載體(ti) (vector)主要包括質粒(plasmid)、噬菌體(ti) (phage)和病毒(virus)三大類。這些載體(ti) 均需經人工構建,除去致病基因,並賦予一些新的功能,如有利於(yu) 進行篩選的標誌基因、單一的限製酶切點等。
①質粒:是存在於(yu) 天然細菌體(ti) 內(nei) 的一種獨立於(yu) 細菌染色體(ti) 之外的雙鏈環狀DNA,具有獨立複製的能力,通常帶有細菌的抗藥基因。②噬菌體(ti) :可通過轉染方式將其DNA送入細菌體(ti) 內(nei) 進行增殖。常用的為(wei) 人工構建的λ噬菌體(ti) 載體(ti) ,當目的基因與(yu) 噬菌體(ti) DNA進行重組時,可采用插入重組方式,也可采用置換重組方式。
③病毒:常用的為(wei) SV40,通過感染方式將其DNA送入哺乳動物細胞中進行增殖。
⑵目的基因:①直接從(cong) 染色體(ti) DNA中分離:僅(jin) 適用於(yu) 原核生物基因的分離。②人工合成:根據已知多肽鏈的氨基酸順序,利用遺傳(chuan) 密碼表推定其核苷酸順序再進行人工合成。適應於(yu) 編碼小分子多肽的基因。③從(cong) mRNA合成cDNA:采用一定的方法釣取特定基因的mRNA,再通過逆轉錄酶催化合成其互補DNA(cD NA),除去RNA鏈後,再用DNA聚合酶合成其互補DNA鏈,從(cong) 而得到雙鏈DNA。④從(cong) 基因文庫中篩選:將某一種基因DNA用適當的限製酶切斷後,與(yu) 載體(ti) DNA重組,再全部轉化宿主細胞,得到含全部基因組DNA的種群,稱為(wei) G文庫(genomic DNA library)。將某種細胞的全部mRNA通過逆轉合成cDNA,然後轉化宿主細胞,得到含全部表達基因的種群,稱為(wei) C-文庫(cDNA library)。C-文庫具有組織細胞特異性。⑤利用PCR合成:如已知目的基因兩(liang) 端的序列,則可采用聚合酶
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