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大鼠血管緊張素轉化酶 (ACE)ky体育在线登陆

大鼠血管緊張素轉化酶 (ACE)ky体育在线登陆,專(zhuan) 業(ye) 實驗代測,本試劑盒含量是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nei) 進行檢測。先將待測物質和生物素標記的抗體(ti) 同時溫育。洗滌後,加入親(qin) 和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然後加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chan) 生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質的濃度呈比例關(guan) 係。

  • 產品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-10-19
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詳細介紹

所有產(chan) 品僅(jin) 供科研使用,不能用於(yu) 食用和醫療等

大鼠血管緊張素轉化酶 (ACE)ky体育在线登陆
產品中文:大鼠血管緊張素轉化酶 (ACE)ky体育在线登陆
產品英文:Mouse ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit
產品規格:48T/96T
所需實驗儀器:酶標儀,洗板機,離心機
保存條件:2-8度
有效期:6個月
       
試劑盒組成:      
試劑盒組成48T96T保存 
說明書1份1份  
封板膜2片(48)2片(96)  
密封袋1個1個  
酶標包被板1×481×962-8℃保存 
標準品0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存 
標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存 
酶標試劑3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存 
樣品稀釋液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存 
顯色劑A液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存 
顯色劑B液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存 
終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存 
濃縮洗滌液(20倍)20ml×1瓶(30倍)20ml×1瓶2-8℃保存 
注:標準品用標準品稀釋液依次做倍比稀釋
標本要求:      
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集後當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃備用。對於隔天再檢測的樣本,及時分裝後凍存在-20℃備用,有條件的,-70℃凍存備用。標本應避免反複凍融。
液體類標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鍾,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉澱,應再次離心。
2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鍾後,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉澱形成,應該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參。 照此實行。
4.細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
5.培養細胞:檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反複凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞並放出細胞內成份。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。
6.組織標本:切割標本後,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝後一份待檢測,其餘冷凍備用。
7.標本采集後盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放於-20℃保存,但應避免反複凍融.
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑製辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠血管緊張素轉化酶 (ACE)ky体育在线登陆
操作步驟
1. 加樣:標準品設定5個濃度點10個孔,每個濃度設定平行孔,加入50微升不同濃度的標準品,空白孔設定1個孔加入50微升蒸餾水(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其餘各步操作相同)、待測樣品孔,在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然後再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加於酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
2. 溫育:用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。
3. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋後備用。
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩幹,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,如此重複5次,拍幹。
5. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
6. 溫育:操作同3。
7. 洗滌:操作同5。
8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鍾.
9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
10. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液後15分鍾以內進行。
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鍾後方可使用,酶標包被板開封後如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,並經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控製在5分鍾內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做複孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大於標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)後再測定,計算時請zui後乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜隻限一次性使用,以避免交叉汙染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
11. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數,即為樣品的實際濃度。
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關係數R值為0.990以上。
2.批內與批間應分別小於9%和11%
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2-8℃
2.有效期:6個月
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