改良吉姆薩染色

服務介紹：

組織切片及細胞塗片經吉姆薩染色後，各類細胞由於(yu) 其成份的差異而呈現出不同的著色，從(cong) 而達到分辨各類細胞的目的。本項目為(wei) 改良吉姆薩染色，適用於(yu) 血塗片，肺泡灌洗液細胞滴片，骨髓細胞塗片，石蠟切片和冰凍切片的染色，染色目的多為(wei) 觀察各類炎性細胞的特征及數量分布。

實驗流程：

塗片/組織切片-改良吉姆薩染色-脫水封片-顯微鏡鏡檢

結果判讀：

樣本準備方法及送樣運輸要求（為(wei) 保證染色成功率，血液、肺泡灌洗液、骨髓樣本建議客戶按以下方法自行塗片固定後送樣）：

1.塗片的製作方法：

1.1 血塗片製備：

（1）取新鮮血液（若用抗凝管收集的血液，放置最好不要超過24h，否則血液中白細胞的數量以及種類會(hui) 明顯減少),選用幹淨的粘附玻片，用移液槍吸取10ul的血液，滴加在玻片的一側(ce) (一般都是磨砂對側(ce) )。

（2）再取一片輔助玻片（也可選用蓋玻片，依據個(ge) 人手的力道習(xi) 慣選擇），以45°角將其寬邊靠近血液，血液沿著接觸邊緣向兩(liang) 邊暈開，當兩(liang) 邊都到達邊緣時，輕輕地穩健且勻速地推向磨砂麵一側(ce) ，進行塗片，然後快速果斷地拿走載玻片。可見塗片首尾分明，厚薄均勻。（一般情況下，塗抹速度力道適中的話，取走玻片時載玻片上的血幾乎無殘留，且塗抹出的血塗片無明顯細胞破碎，變形。在顯微鏡下可觀察到細胞呈單個(ge) 緊密排列，整體(ti) 比較均勻。）

（3）自然晾幹後，用甲醇浸泡固定15min，自然晾幹後4℃保存運輸。

1.2 肺泡灌洗液和骨髓塗片製備：

（1）取細胞懸液，2800r 4℃離心5min去上清。若沉澱紅色較多，則需要用紅細胞裂解液（G2015）裂解紅細胞。細胞沉澱加入紅細胞裂解液200ul，渦旋混勻，放在冰上裂解2min後加入1ml PBS終止裂解。2800r 4℃離心5min去上清後加PBS重懸。若沉澱紅色不多，則不需要裂解紅細胞，直接棄上清液，加PBS重懸。根據細胞沉澱量對應加入PBS：

①若肉眼觀察無明顯細胞沉澱，直接加入50ul PBS，用移液槍吹打混勻後，塗於(yu) 粘附載玻片上提前用組化筆畫好的小圓圈中（3cm×2cm的橢圓)；

②若細胞沉澱量為(wei) 綠豆大小，加入200ul PBS，用移液槍吹打混勻後，吸取50ul，塗於(yu) 粘附載玻片上提前用組化筆畫好的小圓圈中（3cm×2cm的橢圓)；

③若細胞沉澱量很多，黃豆大小或更大，加入1ml PBS,用移液槍吹打混勻後，吸取150ul，塗於(yu) 粘附載玻片上提前用組化筆畫好的大圓圈中（最大長邊約5cm，最大短邊約2cm的橢圓）。在顯微鏡下觀察細胞量的多少，若還是過厚，再用PBS對倍稀釋該細胞懸液，直至在顯微鏡下觀察到細胞量塗布均勻。

（2）用移液槍將細胞懸液鋪滿整個(ge) 圓圈，塗片放置自然晾幹（因細胞未經固定，不可通過烘箱加快晾幹）。

（3）將晾幹後的塗片放入丙酮中浸泡固定1min，自然風幹，4℃保存運輸。

2. 石蠟切片常溫運輸，冰凍切片-20℃運輸。