DiO細胞膜綠色熒光染色

DiO細胞膜綠色熒光染色

服務介紹：

DiO是一種親(qin) 脂性膜染料，可以標記細胞膜和其他脂溶性生物結構。進入細胞膜後可以側(ce) 向擴散，逐漸使整個(ge) 細胞膜被染色。DiO在進入細胞膜之前熒光非常弱，當與(yu) 細胞結合後熒光強度會(hui) 大大增強，被激發後可以發出綠色熒光，並可以用標準的FITC濾光片檢測。DiO最大激發波長484nm，最大發射波長501nm。

實驗流程：

1.細胞固定並破膜：培養(yang) 好的細胞爬片倒去培養(yang) 基，用PBS洗。4%多聚甲醛固定30min，PBS洗3次，每次5min，滴加0.1%TRITON，破膜20min. PBS洗滌2-3次。

2.加dio染料工作液：爬片稍甩幹後用組化筆在蓋玻片中間細胞分布均勻的位置畫圈（防止液體(ti) 流走），加50-100μ dio染料工作液，37℃孵育5-20分鍾，PBS洗3次，每次5 min。

3.DAPI複染細胞核：爬片用PBS（PH7.4）洗滌3次，每次5min。去除PBS後在圈內(nei) 滴加DAPI染液，避光室溫孵育10min

送樣運輸要求：

固定好細胞， 換成PBS，4℃ 運輸到實驗室。目前隻接受細胞爬片。