鬼筆環肽染色

鬼筆環肽染色

服務介紹：

鬼筆環肽(phalloidin)可特異性與(yu) 細胞內(nei) 聚合微絲(si) 中的絲(si) 狀肌動蛋F-actin結合，通過藕聯的熒光素分子，從(cong) 而顯示微絲(si) 骨架在細胞中的分布。與(yu) 抗體(ti) 相比，鬼筆環肽無物種限製，染色特異性極-強，染色區和未染色區對比性非常清晰，而且標記後的肌動蛋白許多生理特性都得以維持。也適用於(yu) 甲醛固定和去垢劑通透處理後的組織或細胞樣本。

實驗流程：

1.細胞固定並破膜：培養(yang) 好的細胞爬片倒去培養(yang) 基，用PBS洗。4%多聚甲醛固定30min，PBS洗3次，每次5min，滴加0.1%TRITON，破膜20min.

2.加鬼筆環肽：爬片稍甩幹後用組化筆在蓋玻片中間細胞分布均勻的位置畫圈（防止液體(ti) 流走），加50-100μl鬼筆環肽工作液，室溫孵育2h，PBS洗3次，每次5 min。

3.DAPI複染細胞核：爬片用PBS（PH7.4）洗滌3次，每次5min。去除PBS後在圈內(nei) 滴加DAPI染液，避光室溫孵育10min

送樣運輸要求：

按細胞準備流程PFA固定細胞15min後用無菌PBS洗滌後用無菌PBS浸泡，離心管封口膜封好，4℃冰袋保存運輸到實驗室