真核mRNA測序5-6G

真核mRNA測序5-6G

服務介紹：

轉錄組測序（mRNA-seq）：基於(yu) Illumina測序平台，對某一物種或特定細胞在某一功能狀態下產(chan) 生的mRNA進行高通量測序，既可以提供定量分析，檢測基因表達水平差異，又可以提供結構分析，發現稀有轉錄本，並且對差異表達基因進行功能注釋。

實驗流程：

樣本處理-TotalRNA抽提與(yu) 質檢-文庫構建-PE150測序-數據分析；

送樣運輸要求：

1）樣品類型：細胞、動物新鮮組織、植物組織、全血、血清、血漿、石蠟切片、或RNA樣品。

2）樣品的量：新鮮動物組織 ≥100mg（含肌纖維或脂肪等組織的樣品 RNA 含量較低，送樣量需增加）。新鮮培養(yang) 細胞 ≥5×10⁶ 個(ge) （請清洗後離心得細胞沉澱，用 TRIzol 充分裂解並幹冰運輸）。新鮮全血 ≥1mL（新鮮血液樣本，不可使用凍存血。建議向新鮮血液中加入 3 倍體(ti) 積的 TRIzol LS 裂解液，幹冰運輸）。血清，血漿（一般是用至少2ml的全血分離出來的量）。PBMC>1*10⁷(加Trzol混勻，避免反複凍融)。植物組織 ≥1g（含多糖多酚等的複雜植物組織，請盡可能多的送樣）。石蠟切片5-10 張/卷（未經 HE 染色的切片；厚度≥5µm；組織區域麵積≥10mm×10mm；有核細胞比例＞80%；腫瘤細胞比例＞20%。建議使用 1 年內(nei) 的 FFPE 樣本）。

3）樣品質量：RNA無明顯降解，提取的總RNA OD260/280值在1.8~2.2之間，濃度 ≥ 500 ng/μl，28S:18S ≥ 1.5，RIN ≥ 7。

4）樣品保存：細胞樣品或新鮮組織塊（切成~50mg的小塊）可用TRIZOL或RNA保護劑處理或液氮凍存後，-80℃保存。RNA樣品可溶於(yu) 乙醇或RNA-free的超純水中，-80℃保存。樣品保存期間避免反複凍融。

5）樣品運輸：樣品置於(yu) 1.5 ml管中，封口膜封好，幹冰運輸。