HPLC方法開發

服務介紹：

色譜分析的目的是將樣品中各組分彼此分離，組分要達到完-全分離，兩(liang) 峰間的距離必須足夠遠，而兩(liang) 峰間的距離是由組分在兩(liang) 相間的分配係數決(jue) 定的，即與(yu) 色譜過程的熱力學性質有關(guan) ，但是兩(liang) 峰間雖有一定距離，如果每個(ge) 峰都很寬，以致彼此重疊，還是不能分開，這些峰的寬或窄是由組分在色譜柱中傳(chuan) 質和擴散行為(wei) 決(jue) 定的，即與(yu) 色譜過程的動力學性質有關(guan) 。因此，要從(cong) 熱力學和動力學兩(liang) 方麵來研究色譜行為(wei) 。

HPLC方法開發的目的就是在熱力學和動力學之間找到分析物的平衡點，以期來更好對樣品中分析組分進行分離，相互定量不產(chan) 生幹擾。

主要設備：色譜儀(yi) Agilent 1260 infinity Ⅱ

液相色譜在藥物研發，環境分析，食品分析，臨(lin) 床醫學等領域廣泛應用，可完成生物樣品中分析物含量測定方法學開發，藥品雜質檢測方法學開發等及相應的方法學驗證。

實驗流程：

標準品測量配製-標品預試-樣品上機預試-調整儀(yi) 器參數-驗證線性倍數-驗證基質幹擾

送樣運輸要求：

1、細胞樣本

①細胞量1x107個(ge) ，收集細胞沉澱，-80℃保存，純幹冰運輸，避免反複凍融。

②收集時，用預冷PBS緩衝(chong) 液清洗三次，去除培養(yang) 基成分，然後離心去除上清保存。

③如需要進行細胞計數，則需送樣前進行。

2、全血樣本

①樣本量200uL，EDTA、EDTA-K2或肝-素鈉抗凝，4℃保存，冰袋運輸，避免劇烈振蕩和冷凍結冰。

②由於(yu) 全血常規保存期為(wei) 7天，如需檢測，需要提前至少1周聯係實驗室確認周期情況，以便溝通協調安排檢測。

3、血清樣本

①樣本量100uL，-80℃保存，純幹冰運輸，避免反複凍融。

②樣本應盡量避免溶血。

4、血漿樣本

①樣本量100uL，-80℃保存，純幹冰運輸，避免反複凍融。

②樣本應盡量避免溶血。

5、尿液樣本

①樣本量200uL，-80℃保存，純幹冰運輸，避免反複凍融。

②樣品應盡量避免帶入糞便殘渣。

6、動物組織樣本

①樣本量300mg，-80℃保存，純幹冰運輸，避免反複凍融。

②收集時，用預冷PBS緩衝(chong) 液衝(chong) 洗表麵血液，並用濾紙吸幹多餘(yu) 水分，避免凍存時結冰。

③固定液浸泡過的樣本無法進行檢測。

7、植物組織樣本

①樣本量500mg，-80℃保存，純幹冰運輸，避免反複凍融。

②收集時，用預冷PBS緩衝(chong) 液衝(chong) 洗表麵泥沙，並用濾紙吸幹多餘(yu) 水分，避免凍存時結冰。

③固定液浸泡過的樣本無法進行檢測。