大鼠淋巴細胞因子ELISA Kit訂購指南

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Rat lymphocyte factor ELISA Kit
規格： 48T/96T
我們(men) 的elisa試劑盒具有如下優(you) 點：
 
    一、高效、靈敏、特異的抗體(ti) ；
　　二、穩定的重複性和可靠性；
　　三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體(ti) ；
　　四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yang) 上清液、尿液等等多種標本類型；
　　五、性價(jia) 比非常好，節省實驗經費。
ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。自上世紀70年代初問世 以來，發展十分迅速，目前已被廣泛用 於(yu) 生物學和醫學科學的許多領域。
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Rat lymphocyte factor ELISA Kit
ELISA技術原理：以免疫學反應為(wei) 基礎，將抗原、抗體(ti) 的特異性反應與(yu) 酶對底
物的高效催化作用相結合起來
1. 抗原或抗體(ti) 的固相化及抗原或抗體(ti) 的酶標記。
2. 結合在固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 仍保持其免疫學活性。
3. 酶標記的抗原或抗體(ti) 既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
4. 受檢標本與(yu) 固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 起反應。再加入酶標記 的抗原或抗體(ti) ，也通過反應而結合在固相載體(ti) 上。
5. 此時固相上的酶量與(yu) 標本中受檢物質的量呈一定的比例。
6. 加入酶反應的底物後，底物被酶催化成為(wei) 有色產(chan) 物，產(chan) 物的量 與(yu) 標本中受檢物質的量直接相關(guan) ，故可根據呈色的深淺進行定 性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水 平），並且重複性好。

Rat lymphocyte factor ELISA Kit
 
我們(men) 采用的酶： 辣根過氧化酶（HRP）
1. HRP在蔬菜作物辣根中含量很高。
2. 是一種糖蛋白，含糖量約18％；分子量為(wei) 44kD。
3. 是一種複合酶，由主酶（酶蛋白）和輔基（亞(ya) 鐵血紅素）結合 而成的一種卟啉蛋白質。
4. 主酶為(wei) 無色糖蛋白，在275nm波長處有zui高吸收峰；輔基是深 棕色的含鐵卟啉環，在403nm波長處有zui高吸收峰。
HRP催化下列反應：
DH2+H2O2<==HRP==>D+2H2O
上式中DH2為(wei) 供氫體(ti) ，H2O2為(wei) 受氫體(ti) 。HRP對受氫體(ti) 的專(zhuan) 一 性很高，除H2O2外，僅(jin) 作用於(yu) 小分子醇的過氧化物和尿素的過 氧化物。後者為(wei) 固體(ti) ，作為(wei) 試劑較H2O2方便。許多化合物可作 為(wei) HRP的供氫體(ti) ，在ELISA中常用的供氫體(ti) 底物為(wei) 鄰苯二胺（orthopenylenediamine，OPD）、四甲基聯苯胺（3，3'， 5，5'-tetramethylbenzidine，TMB）和ABTS[2，2'-azino- bis(3-ethyl-benzthiazolinesulfonate-6)]。

Rat lymphocyte factor ELISA Kit
測定步驟
1.加樣
 1. 除包被外都需45度加樣
 2.加樣體(ti) 積要準確
 3.管底加樣，不能加在管壁上
 4.加樣時不能產(chan) 生氣泡
2.溫浴 
 1.加標本後和加結合物後，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
 2.各ELISA板不應疊在一起。
 3.為(wei) 避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
 4.加入底物後，反應的時間和溫度通常不做嚴(yan) 格要求。 如室溫高於(yu) 20℃，ELISA板可避光放在實驗台上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌 
 1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決(jue) 定實驗成敗的關(guan) 鍵。
 2.目的是洗去反應液中沒有與(yu) 固相抗原或 抗體(ti) 結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附於(yu) 固相載體(ti) 的幹擾物質。
4.讀板 
 1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
 2.如用酶標儀(yi) 測定結果，準確性決(jue) 定於(yu) ELISA板底的平整與(yu) 透明度、酶標儀(yi) 的質 量和軟件的算法。
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