PRODUCT CLASSIFICATION
產品分類TUNEL是分子生物學與(yu) 形態學相結合的研究方法,對完整的單個(ge) 凋亡細胞核或凋亡小體(ti) 進行原位染色,能準確的反應細胞凋亡Z典型的生物化學和形態特征,可用於(yu) 石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養(yang) 的細胞和從(cong) 組織中分離的細胞的細胞凋亡測定,並可檢測出極少量的凋亡細胞,靈敏度遠比一般的組織化學和生物化學測定法要高,因而在細胞凋亡的研究中已被廣泛采用。 TUNEL檢測服務(細胞凋亡)
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TUNEL檢測服務(細胞凋亡)
簡介
TUNLE即原位末端轉移酶標記技術。凋亡細胞的DNA雙鏈斷裂或一條鏈出現缺口,產(chan) 生一係列3′-OH末端,在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)作用下,將脫氧核糖核苷酸和生物素所形成的衍生物標記到DNA的3′末端,從(cong) 而進行凋亡細胞的檢測。TUNEL是分子生物學與(yu) 形態學相結合的研究方法,對完整的單個(ge) 凋亡細胞核或凋亡小體(ti) 進行原位染色,能準確的反應細胞凋亡zui典型的生物化學和形態特征,可用於(yu) 石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養(yang) 的細胞和從(cong) 組織中分離的細胞的細胞凋亡測定,並可檢測出極少量的凋亡細胞,靈敏度遠比一般的組織化學和生物化學測定法要高,因而在細胞凋亡的研究中已被廣泛采用。
TUNEL檢測服務(細胞凋亡)的原理:
細胞在發生凋亡時,會(hui) 激活一些DNA內(nei) 切酶,這些內(nei) 切酶會(hui) 切斷核小體(ti) 間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測,可以發現180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標記的dUTP (fluorescein-dUTP) ,從(cong) 而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀(yi) 進行檢測,這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測細胞凋亡的原理。
TUNEL檢測(石蠟切片) | 取下適當的新鮮的組織塊固定於(yu) 4%-10%濃度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛與(yu) 組織塊體(ti) 積比在10:1和20:1之間,4攝氏度保存運輸; |
TUNEL檢測(冰凍切片) | 取下的新鮮組織應立即放入超低溫冰箱或者液氮中,用幹冰運輸,固定好的切片應於(yu) -80或者-20度保存,並盡快用於(yu) 檢測; |
TUNEL檢測(細胞爬片) | 細胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,換PBS緩衝(chong) 液4度保存運輸,盡快用於(yu) 檢測; |
熒光法需要先拍一張凋亡熒光圖,再拍一張原位染核圖,再合並圖層,zui終我們(men) 提供的為(wei) 三張熒光圖片。