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上海信帆生物提供 Western Blotting檢測服務，全程提供技術指導，代測時間為(wei) 兩(liang) 周，歡迎！Western Blotting檢測,WB實驗代測，WB實驗服務
產品型號：廠商性質：生產廠家更新時間：2024-10-08訪 問 量：2818
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Western Blotting檢測,WB實驗代測，WB實驗服務
免疫印跡（immunoblotting）又稱蛋白質印跡（Western blotting），它是根據抗原抗體(ti) 的特異性結合檢
測複雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫
生化技術。由於(yu) 免疫印跡具有SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現已成為(wei) 蛋白分
析的一種常規技術。免疫印跡常用於(yu) 鑒定某種蛋白，並能對蛋白進行定性和半定量分析。
凝膠遷移或電泳遷移率實驗（EMSA-electrophoretic mobility shift assay）是一種研究DNA 結合蛋
白和其相關(guan) 的DNA 結合序列相互作用的技術，可用於(yu) 定性和定量分析。這一技術zui初用於(yu) 研究DNA 結合蛋白，目前已用於(yu) 研究RNA 結合蛋白和特定的RNA 序列的相互作用。
Western Blotting 技術服務
| 項目 | 市場價(jia) （元） | 優(you) 惠價(jia) （元） | 說明 |
| Western blot 檢測 | 1500元/膜 | 電訊元/膜 | 每張膜1--8樣本（一抗需確認） |
| EMSA 800 | 2800元/膜 | 電訊元/膜 | 每張膜1--8樣本(探針及試劑需確認) |
Western Blotting 技術服務
Western Blotting檢測,WB實驗代測，WB實驗服務
Western blot樣本要求
客戶需新鮮或正確保存的蛋白樣品， 檢測目的蛋白的一抗（或由本公司代購）。樣品要求為(wei) ：
1、裂解樣品總蛋白量>500ug/樣品。
2、細胞樣品總蛋白濃度>1mg/ml。
3、組織樣品總蛋白濃度>10-15mg/ml。
Western blot結果及數據提供
內(nei) 參蛋白和目的蛋白曝光膠片各一張，可提供掃描圖，實驗報告，包括整個(ge) 試驗流程所涉及的實驗數據和實驗步驟。如需進行蛋白純化服務，將提供檢測報告
Western blot實驗服務
服務內(nei) 容
我們(men) 提供從(cong) 蛋白製備、蛋白電泳到Western blot檢測的全流程服務，如需要還可進行灰度分析。
說明
1、建議提供目的蛋白陽性表達樣品（純蛋白或有陽性表達的細胞或組織）作為(wei) 陽性對照。
2、每張膜檢測1-8個(ge) 樣品。
3、如果一抗由客戶提供，請在正確條件下保存，避免汙染及反複凍融。
關(guan) 於(yu) Western blot實驗異常分析
『無信號』
| 原因 | 建議 |
| 一抗與二抗不匹配 | 選擇針對一抗來源種屬製備的二抗； |
| 一抗不識別目的的種屬的蛋白 | 1)檢查抗體(ti) 的說明書(shu) ，適用範圍內(nei) 是否包含目的種屬 |
| 一抗或二抗不足，沒有足夠的抗體結合到目的蛋白 | 1)降低抗體(ti) 稀釋倍數，增加抗體(ti) 濃度 |
| 封閉劑與一抗有交叉反應 | 改變封閉劑 |
| 抗原不足 | 1)每個(ge) 泳道加入20-30ug總蛋白 |
| 在檢測的組織內目的蛋白表達水平低 | 檢測樣本不表達目的蛋白選擇表達量高的細胞作為陽性對照，用於確定檢測樣本是否為陰性，也可更換細胞係 |
| 蛋白轉膜效率低 | 1)利用麗(li) 春紅檢測轉膜效率;檢查轉移裝置是否電極弄反 |
| 膜過渡洗滌 | 減少洗滌時間和強度 |
| 疊氮鈉抑製二抗活性 | 二抗稀釋液內不用疊氮鈉 |
『沒有特異條帶』
| 原因 | 建議 |
| 細胞係傳代過多後蛋白表達譜發送變化 | 1)使用未傳代或傳代次數較少的細胞係進行樣品製備 |
| 蛋白本身有很多修飾 | 1)查閱文獻，確定目的蛋白是否存在多種修飾 |
| 蛋白被消化或者降解 | 1)蛋白樣品確保未被汙染，確保含有蛋白酶抑製劑 |
| 所檢測蛋白存在多種剪接體，導致分子量大小不同 | 1)查閱文獻或者通過搜索數據庫來確定該蛋白是否存在多種長度不同的編碼mRNA |
| 一抗或二抗濃度高 | 1)減低抗體濃度 |
| 洗滌不夠 | 1)充分洗滌 |
『條帶大小不正確』
| 原因 | 建議 |
| 目的蛋白被降解 | 確保蛋白樣品未被汙染，確保含有蛋白酶抑製劑 |
| 存在不同的剪接體 | 查閱文獻或者通過搜索數據庫來確定該蛋白是否存在多種長度不同的編碼mRNA |
| 重組蛋白 | 檢測是否存在額外加入的蛋白 |
| 特殊蛋白如MDM2等 | 仔細閱讀抗體說明書 |
尊敬的客戶：
本公司有放射免疫技術服務、蛋白質組學服務、免疫組化、PCR技術服務、生物信息學數據分析等，如果您想了解Western blot的更多內(nei) 容或者其他服務信息，您可以本公司的了解更多產(chan) 品的詳細信息，至善至美的服務是我們(men) 永無止境的追求，歡迎新老客戶放心選購自己心儀(yi) 產(chan) 品，我們(men) 將竭誠為(wei) 您服務！
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