支原體(ti) 染色液(Dienes)
產品簡介：
支原體(ti) 染色液(Dienes染色液)是一種經典的利用天青美藍染色檢測支原體(ti) 汙染的試劑，經常用於(yu) 培養(yang) 的貼壁或懸浮細胞以及組織切片的細胞凋亡檢測，該試劑檢測細胞含量範圍一般為(wei) 0.1～1×106 之間，Dienes 染色液亦可用於(yu) 泌尿生殖道感染細菌的染色鑒別。
該試劑僅(jin) 用於(yu) 科研領域，不適用於(yu) 臨(lin) 床診斷或其他用途。
產(chan) 品組成：
自備材料：
1、PBS 或生理鹽水
2、載玻片、蓋玻片
3、顯微鏡
操作步驟(僅供參考)：
(一)貼壁細胞
1、取潔淨蓋玻片在 70%乙醇中浸泡 5 分鍾或更長時間，無菌超淨台內吹幹或用無菌 PBS
或生理鹽水洗滌 3 次，再用細胞培養液洗滌 1 次。
2、將蓋玻片置於 6 孔板或其他培養皿內，接種細胞培養過夜，使融合率約為 50%～80%。
3、加入 Dienes 染色液覆蓋表麵，孵育 1～2min。
4、棄染色液，PBS 或生理鹽水洗 2 次，每次 3min，吸盡液體。
5、顯微鏡下觀察。
(二)懸浮細胞
1、低速離心後吸去大部分液體保留約 50μl 液體，再緩緩懸起細胞，滴加至載玻片上，盡
量使細胞分布均勻。
2、稍晾幹，使細胞貼在載玻片上不易隨液體流動。
3、加入 Dienes 染色液覆蓋表麵，孵育 1～2min。
4、棄染色液，PBS 或生理鹽水洗 2 次，每次 3min，吸盡液體。
5、顯微鏡下觀察。
(三)懸浮細胞
1、用棉試子在載玻片上塗一層 Dienes 染色液，待幹。
2、挑取細菌，置於載玻片上。
3、覆蓋玻片，密封，觀察菌落形態。
(四)支原體菌落
1、將
3、加入 Dienes 染色液覆蓋表麵，孵育 1～2min。
4、棄染色液，PBS 或生理鹽水洗 2 次，每次 3min，吸盡液體。
染色結果：
支原體菌落呈藍色，L 型細菌菌落在短時間內呈藍色，但 30~60min 後逐漸褪色，呈無色。
注意事項：
1、在為了獲得細胞沉澱的離心的過程中，對於特殊細胞，如果細胞沉澱不充分，可以適當
提高離心力或延長離心時間。
2、如染色太深不宜觀察，可用蒸餾水將染液稀釋 50~300 倍。
3、為了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。
有效期：12 個月有效。
支原體(ti) 染色液(Dienes )
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