睾酮檢測試劑盒

所有產(chan) 品僅(jin) 供科研使用，不能用於(yu) 食用和醫療等

睾酮檢測試劑盒
試劑盒使用說明書(shu)
本試劑盒僅(jin) 供研究使用。
檢測範圍：   96T 
0.4nmol/L   - 12nmol/L   
使用目的：
本試劑盒用於(yu) 測定科研血清、血漿及相關(guan) 液體(ti) 樣本中睾酮（T）含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體(ti) 夾心法測定標本中人睾酮（T）水平。用純化的人睾酮（T）抗體(ti) 包被微
孔板，製成固相抗體(ti) ，往包被單抗的微孔中依次加入睾酮（T），再與(yu) HRP 標記的睾酮（T）抗體(ti)
結合，形成抗體(ti) -抗原-酶標抗體(ti) 複合物，經過*洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP
酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的睾酮（T）
呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在 450nm 波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人睾
酮（T）濃度。  
試劑盒組成  
1  30 倍濃縮洗滌液  20ml×1 瓶  7  終止液  6ml×1 瓶
2  酶標試劑  6ml×1 瓶  8  標準品（24nmol/L ）  0.5ml×1 瓶
3  酶標包被板  12孔×8 條  9  標準品稀釋液  1.5 ml×1 瓶
4  樣品稀釋液  6ml×1 瓶  10  說明書(shu)   1 份
5  顯色劑 A 液  6ml×1 瓶  11   封板膜  2 張    
6  顯色劑 B 液  6ml×1/ 瓶  12  密封袋  1 個(ge)
標本要求  
1．標本采集後盡早進行提取，提取按相關(guan) 文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放於(yu) -20℃保存，但應避免反複凍融
2．不能檢測含 NaN3的樣品，因NaN3抑製辣根過氧化物酶的（HRP ）活性。
操作步驟
1.   標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
12nmol/L   5 號標準品  150µl 的原倍標準品加入 15 0µl 標準品稀釋液
6nmol/L  4 號標準品  150µl 的5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
3nmol/L  3 號標準品  150µl 的4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
1.5 nmol/L   2 號標準品  150µl 的3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
0.7 5 nmol/L  1 號標準品  150µl 的2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 
 2.   加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘(yu) 各步操作相同）、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，
然後再加待測樣品 10 µl（樣品zui終稀釋度為(wei) 5 倍）。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.   溫育：用封板膜封板後置 37℃溫育 30 分鍾。      
4.   配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋後備用
5.   洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置30秒後棄去，如此
重複5 次，拍幹。
6.   加酶：每孔加入酶標試劑 50µl，空白孔除外。  
7.   溫育：操作同 3。
8.   洗滌：操作同 5。
9.   顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15分鍾.
10.  終止：每孔加終止液50µl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.  測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。  測定應在加終止
液後15 分鍾以內(nei) 進行。
睾酮檢測試劑盒
操作程序總結：
計算
    以標準物的濃度為(wei) 橫坐標，OD 值為(wei) 縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的
OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與(yu) OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，
即為(wei) 樣品的實際濃度。  
注意事項
1．試劑盒從(cong) 冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鍾後方可使用，酶標包被板開封後如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(hui) 有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，並經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控製在 5 分鍾內(nei) ，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做複孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值
大於(yu) 標準品孔*孔的 OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n 倍）後再測定，計
算時請zui後乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5． 封板膜隻限一次性使用，以避免交叉汙染。
6．底物請避光保存。
7．嚴(yan) 格按照說明書(shu) 的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀(yi) 讀數為(wei) 準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuan) 染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10.  如與(yu) 英文說明書(shu) 有異，以英文說明書(shu) 為(wei) 準。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 個(ge) 月 
    

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