熒光核酸染料

熒光核酸染料

【產(chan) 品名稱】 ：核酸染料

【產(chan) 品規格】 ：0.5ml 

【儲(chu) 存條件】 ：常溫保存

【有效期】 ：見標簽 

【產(chan) 品簡介】 ：

GelRed 和GelGreen 是兩(liang) 種集高靈敏、低毒性和超穩定於(yu) 一身的熒光核酸凝膠染色試劑。其水溶染色劑通過美國環保局安全認定，廢棄物可直接倒入下水道，而不會(hui) 造成任何環境汙染。目前大多數商業(ye) 化的核酸染料（凝膠染色試劑）總是在安全性、穩定性和靈敏性等方麵不令人滿意。例如，雖然 EB (溴化乙啶）作為(wei) 目前使用的核酸凝膠染色試劑，能夠在多數應用中提供可以接受的靈敏度，但它是一種高誘變性的化學物質。而且EB染色後具有較高的背景熒光信號。 SYBR Green I 和 SYBR Gold 也被廠家宣傳(chuan) 的凝膠染色試劑。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微堿性電泳緩衝(chong) 溶液或預製凝膠中會(hui) 快速降解，穩定性差導致染色效果極不可靠。 SYBR safe 被認為(wei) 是市場上較為(wei) 安全的核酸染料 ，但它的染色效果還遠不及 SYBR Green I 。

Solargel Red是一種靈敏、穩定和相對安全的熒光核酸染色試劑。它可以替代高毒性染色劑－溴化乙錠（EB），用於(yu) 瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中dsDNA和ssDNA的染色。Solargel Red的靈敏度遠高於(yu) EB，並且不需要脫色。由於(yu) Solargel Red和EB有相同的光譜特性，因此用它替代EB時不需要更換成像係統。既可用於(yu) 預製凝膠也可用於(yu) 電泳後染色。通常電泳後染色的靈敏度更高，並能排除染料對DNA遷移的幹擾。使用Solargel Red進行電泳後染色，操作簡單不需要脫色和特殊溶液。隻要將染料稀釋在0.1MNaCl中，並將凝膠置於(yu) 染色液中，30分鍾後就可以觀察。染色液在室溫下極為(wei) 穩定，可以多次反複使用。相比而言，預製凝膠由於(yu) 不需要額外染色過程，因此染料用量更少，更為(wei) 簡單經濟。

本產(chan) 品僅(jin) 供科研實驗用，不做其它用途！

【染色特點】 ：

1、無毒性：Solargel Red的油性和大分子量特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內(nei) ，艾姆斯氏試驗結果也表明，該染料的誘變性遠遠小於(yu) EB。

2、靈敏度高：適用於(yu) 各種大小片段的電泳染色，對核酸遷移的影響小於(yu) SYBR Green I。

3、穩定性高： 適用於(yu) 使用微波或其它加熱方法製備瓊脂糖凝膠;室溫下在酸或堿緩衝(chong) 液中極其穩定，耐光性強。

4、信噪比高：樣品熒光信號強，背景信號低。

5、操作簡單：與(yu) EB 一樣，在預製膠和電泳過程中染料不降解;而電泳後染色過程也隻需30 分鍾且無需脫色或衝(chong) 洗 ，即可直接用紫外凝膠透射儀(yi) 觀察。

6、適用範圍廣：可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳後染色(泡染法);適用於(yu) 瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可用於(yu) dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。

與(yu) EB有相同的光譜特性，無需改變濾光片及觀察裝置：標準的 EB 濾光片或 SYBR 濾光片都適用，使用與(yu) 觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀(yi) 觀察即可。但是Solargel Red不能被488 nm氬離子激光器或相似波長的可見光激發，因此不推薦使用此類激發裝置的成像係統。對於(yu) 此類裝置，我們(men) 推薦您使用gelred ，它和SYBR Green I的光譜相似，靈敏度相當，但更加穩定。

Solargel Red 使用方法簡介

1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)

(1) 製膠時加入Solargel Red核酸染料(例如：每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL Solargel Red10,000× 儲(chu) 液，以此比例類推)。

(2) 按照常規方法進行電泳。

【注意事項】 ：

(1) 此方法染色染料用量相對較少。500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。

(2) 由於(yu) Solargel Red具有良好的熱穩定性，可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷卻。搖晃，振蕩或者翻轉以保證染料充分混勻。也可以選擇將Solargel Red儲(chu) 液加到瓊脂糖粉末和電泳緩衝(chong) 液中，然後用微波爐或其他常用方式加熱以製備瓊脂糖凝膠。gelred兼容所有常用的電泳緩衝(chong) 溶液。

(3) 如果總是看到條帶彌散或分離不理想，建議使用泡染法染色以確認問題是否與(yu) 染料有關(guan) 。如果染色後問題依舊存在，則說明問題與(yu) 染料無關(guan) ，請嚐試：降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時間以保證邊緣清晰;改進上樣技巧或選擇泡染法染色。

(4) 此方法不適合預製聚丙烯酰胺凝膠，對於(yu) 聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。

2.泡染法

(1) 按照常規方法進行電泳。

(2) 用H2O將Solargel Red10,000× 儲(chu) 液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中，製成3× 染色液。(例如將15μL Solargel Red 10,000× 儲(chu) 液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。

(3) 將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右，染色時間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對於(yu) 含3.5～10%丙烯酰胺的凝膠，染色時間通常介於(yu) 30min到1h，並隨丙烯酰胺含量增加而延長。

(1) 用泡染法染色時，染料用量較多。單次使用的染色液可重複使用3次左右。

(2) 3×Solargel Red染色液可以大量製備，在室溫下避光保存直至用完。

【特別提醒】 ：

(1) 如果您使用的是紫外成像儀(yi) ，請選擇Solargel Red ;如果您使用激光成像儀(yi) 或希望在可見光下觀測，請選擇Solargel Red。

(2) 在極少數情況下，質粒經某些酶切後的DNA樣品會(hui) 出現拖尾和分辨率降低，此時建議同時嚐試兩(liang) 種染色方法以決(jue) 定哪種方法更加合適。

熒光核酸染料