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信帆生物提供腺病毒包裝係統及病毒實驗!

更新時間:2017-12-15      瀏覽次數:1608

信帆生物提供腺病毒包裝係統及病毒實驗!

腺病毒載體(ti) 是以腺病毒為(wei) 原型進行基因功能改造而成的無外殼的雙鏈DNA病毒,由於(yu) 其具有宿主範圍廣、可感染分裂和非分裂細胞、高滴度製備、外源基因裝載容量大等優(you) 點,重組腺病毒已越來越廣泛地被應用於(yu) 基礎研究和研究試驗中,並成為(wei) 世界上zui常用的基因治療載體(ti) 之一。

病毒包裝係統及病毒實驗的優(you) 點:

1、可感染的細胞種類多,宿主廣泛;
2、感染效率高,特別適合質粒載體(ti) 轉染效率低的細胞,如原代細胞、神經細胞等,且目的蛋白表達水平高;
3、可包裝大片段的外源基因,高達10kb;
4、不整合到細胞染色體(ti) 中,生物安全性高。
腺病毒包裝技術主要原理是將目的片段克隆到腺病毒表達載體(ti) 上,表達載體(ti) 和包裝質粒通過重組導入腺病毒包裝細胞進行包裝,包裝好的病毒進一步進行擴增和滴度測定。

信帆生物提供腺病毒包裝係統及病毒實驗!

AdMAX係統:
AdMax包裝係統是通過Cre/loxP 獲得重組病毒,這個(ge) 過程發生在HEK293細胞中,從(cong) 而避免在細菌中重組。將克隆了外源基因的腺病毒穿梭質粒與(yu) 攜帶了腺病毒大部分基因組的包裝質粒共轉染HEK293細胞,利用Cre/loxP係統的作用實現重組,產(chan) 生重組腺病毒。這個(ge) 係統有多種優(you) 勢,包括操作簡便、重組效率高、獲得的病毒產(chan) 率高、目的基因的表達水平高(因為(wei) mCMV啟動子比hCMV啟動子強若幹倍)等。
可根據不同的研究需求構建腺病毒穿梭載體(ti) ,如用於(yu) RNAi的腺病毒載體(ti) 、用於(yu) 基因過表達的腺病毒載體(ti) 、用於(yu) 啟動子活性研究的腺病毒載體(ti) 等

技術流程:
1.獲得目的基因序列;
2.構建病毒表達載體(ti) 質粒;
3.表達載體(ti) 質粒和包裝質粒重組;
4.感染HEK293,包裝出病毒;
5.病毒擴增、濃縮;
6.滴度測定。

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