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植物6-苄氨基喋呤(6BA)檢測試劑盒簡介!

更新時間:2017-12-11      瀏覽次數:2780

植物6-苄氨基喋呤(6BA)檢測試劑盒簡介!

檢測目的

本試劑盒用於(yu) 測定植物血清、血漿及相關(guan) 液體(ti) 樣本中6-苄氨基喋呤(6BA)含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體(ti) 夾心法測定標本中植物6-苄氨基喋呤(6BA)水平。用純化 的植物6-苄氨基喋呤(6BA)抗體(ti) 包被微孔板,製成固相抗體(ti) ,往包被單抗的微孔中 依次加入6-苄氨基喋呤(6BA),再與(yu) HRP 標記的6-苄氨基喋呤(6BA)抗 體(ti) 結合,形成抗體(ti) -抗原-酶標抗體(ti) 複合物,經過*洗滌後加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的6-苄氨基喋呤(6BA)呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標 準曲線計算樣品中植物6-苄氨基喋呤(6BA)濃度。

ELISA 的樣本實驗準備

在收集樣本前都必須有一個(ge) 完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集後當天就進行檢測的樣本,及時儲(chu) 存在4℃備用。對於(yu) 隔天再檢測的樣本,及時分裝後凍存在-20℃備用,有條件的,-70℃凍存備用。標本應避免反複凍融。

液體(ti) 類標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yang) 上清等。

植物6-苄氨基喋呤(6BA)檢測試劑盒簡介!

  • 血清:室溫血液自然凝固10-20分鍾,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉澱,應再次離心。
  • 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鍾後,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉澱形成,應該再次離心。
  • 尿液:用無菌管收集,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
  • 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
  • 培養細胞:檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反複凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞並放出細胞內成份。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。
  • 組織標本:切割標本後,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝後一份待檢測,其餘冷凍備用。
  • 標本采集後盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放於-20℃保存,但應避免反複凍融.
  • 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑製辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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  • 注意事項

     

  • 1.試劑盒從(cong) 冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鍾後方可使用,酶標包被板開封後如未 用完,板條應裝入密封袋中保存。

  • 2.濃洗滌液可能會(hui) 有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

  • 3.各步加樣均應使用加樣器,並經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間 控製在 5 分鍾內(nei) ,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

    4 請每次測定的同時做標準曲線,做複孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD  大於(yu) 標準品孔*孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)後再測定,計 算時請zui後乘以總稀釋倍數(×n×5)。

  • 5 封板膜隻限一次性使用,以避免交叉汙染。

  • 6.底物請避光保存。

  • 7.嚴(yan) 格按照說明書(shu) 的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀(yi) 讀數為(wei) 準.

  • 8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuan) 染物處理。

  • 9.本試劑不同批號組分不得混用。

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