人胃泌素17（GT-17）elisa試劑盒產品簡介

人胃泌素17(GT-17)elisa試劑盒產(chan) 品簡介

ELISA簡介

ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。自上世紀70年代初問世 以來，發展十分迅速，目前已被廣泛用 於(yu) 生物學和醫學科學的許多領域。

ELISA的基礎是抗原或抗體(ti) 的固相化及抗原或抗體(ti) 的酶標記。結合在固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體(ti) 既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體(ti) 或抗原）與(yu) 固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 起反應。用洗滌的方法使固相載體(ti) 上形成的抗原抗體(ti) 複合物與(yu) 液體(ti) 中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體(ti) ，也通過反應而結合在固相載體(ti) 上。此時固相上的酶量與(yu) 標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物後，底物被酶催化成為(wei) 有色產(chan) 物，產(chan) 物的量與(yu) 標本中受檢物質的量直接相關(guan) ，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由於(yu) 酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。

實驗原理：

本試劑盒應用雙抗體(ti) 夾心法測定標本中人胃泌素17(GT-17)水平。用純化 的人胃泌素17(GT-17)抗體(ti) 包被微孔板，製成固相抗體(ti) ，往包被單抗的微孔中 依次加入胃泌素17(GT-17)，再與(yu) HRP 標記的胃泌素17(GT-17)抗 體(ti) 結合，形成抗體(ti) -抗原-酶標抗體(ti) 複合物，經過*洗滌後加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胃泌素17(GT-17)呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標 準曲線計算樣品中人胃泌素17(GT-17)濃度。

人胃泌素17(GT-17)elisa試劑盒產(chan) 品簡介

操作步驟

• 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀 釋。

• 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl， 然後再加待測樣品 10µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加於酶標板孔底部，盡 量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
• 溫育：用封板膜封板後置 37℃溫育 30 分鍾。
• 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋後備用
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒後棄去，如此

    重複 5 次，拍幹。

• 加酶：每孔加入酶標試劑 50µl，空白孔除外。
• 溫育：操作同 3。
• 洗滌：操作同 5。
• 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

        15 分鍾.

• 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
• 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止 液後 15 分鍾以內進行。
• 操作程序總結：

人胃泌素17(GT-17)elisa試劑盒產(chan) 品簡介