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更新時間:2017-10-04
瀏覽次數:1355白細胞介素8(IL-8)elisa試劑盒簡介
IL-8
白細胞介素-8
1、細胞來源:il-8主要由單核-巨噬細胞產(chan) 生;其他如成纖維細胞、上皮細胞、內(nei) 皮細胞、肝細胞等亦可在適宜的刺激條件下產(chan) 生il-8。
il-8的分子量約8kd,主要活性形式為(wei) 72個(ge) 氨基酸。il-8的氨基酸順序與(yu) 許多炎症因子有較高的同源性,屬於(yu) 同一個(ge) 家族;現初步證實il-8家族(亦稱pf4家族)至少有12個(ge) 成員。
2、主要生物學活性:吸引和激活中性粒細胞,曾被命名為(wei) 中性粒細胞激活肽(naf)、粒細胞趨化肽(gcp)、中性粒細胞激活因子(naf)等。中性粒細胞與(yu) il-8接觸後發生形態變化,定向遊走到反應部位並釋放一係列活性產(chan) 物;這些作用可導致機體(ti) 局部的炎症反應,達到殺菌和細胞損傷(shang) 的目的。此外il-8對嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞和淋巴細胞也有一定作用。
白細胞介素8(IL-8)elisa試劑盒標本技術
標本的采集和保存
ELISA試驗所用標本主要為(wei) 血清,也可以用經過預處理的唾液、尿液、糞便等生物材料。患者標本可能含有幹擾試驗的免疫物質,導致假陽性或者假陰性的結果,幹擾因素一般可分為(wei) 兩(liang) 類,即內(nei) 源性和外源性幹擾因素。內(nei) 源性幹擾因素包括類風濕因子、補體(ti) 、高濃度的非特異性免疫球蛋白等,避免內(nei) 源性幹擾因素主要通過選擇合理的試劑。外源性幹擾因素包括標本溶血、標本被細菌汙染、儲(chu) 存時間過長及標本凝固等。在血液采集和運輸過程時,應注意避免溶血。否則,紅細胞溶解時會(hui) 釋放出血紅蛋白,血紅蛋白中的亞(ya) 鐵血紅素具有過氧化物酶活性的物質,在以HRP為(wei) 標記的ELISA試驗測定中,可能會(hui) 增加非特異性顯色而出現假陽性結果。血清標本適宜在新鮮時檢測,若推遲檢測需將標本低溫保存。一般說來,在7天內(nei) 檢測的血清標本,可放置於(yu) 2℃~8℃保存,超過1周檢測的需低溫冰存。因反複冰融會(hui) 使抗體(ti) 效價(jia) 降低,所以,對需要保存做多次抗體(ti) 測定的血清標本,應少量分裝並冰存。血清標本應充分離心,否則可因殘留的纖維蛋白原非特異吸附於(yu) 微孔而造成假陽性結果。
加樣操作中,依次有3次加樣,即加標本、加酶結合物、加底物。加標本一般采用手工加樣或者加樣器。手工加樣每次必須更換吸嘴,以避免交叉感染。要掌握好並在實際操作中揣摩使用技巧,避免吸樣量過多或過少。加樣器在長時間使用時會(hui) 因機械磨損或推動杆內(nei) 附著的血痂等原因造成加樣不準,因此必須定期對加樣器進行維護和校準。加酶結合物和底物一般可直接滴加。每次加樣時,應將所加物置於(yu) ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,注意不可濺出,不能產(chan) 生氣泡,加酶試劑後要用吸水紙在酶標板上輕輕擦拭吸幹。加底物操作時應注意各試劑盒顯色劑不能混用,添加順序不能顛倒,不能濺出孔外。標本較多時,需要分批操作,以免加樣板過多,造成加樣後放入孵箱前等待時間過長(尤其是在室溫較高時)。zui後,在微型振蕩器上震蕩lmin,以保證混勻。
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