揭秘硫酸乙酰肝素蛋白多糖（HSPG）ky体育在线登陆

硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)ky体育在线登陆基本信息

與(yu) 細胞內(nei) 顆粒相結合的蛋白聚糖。存在於(yu) 多種細胞中，其核心蛋白質具有絲(si) 氨酸和甘氨酸交替的伸展序列，連接的糖胺聚糖為(wei) 硫酸軟骨素和/或硫酸乙酰肝素鏈。因其有聚陰離子性質，在維持胞內(nei) 電中性中起作用。

硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)ky体育在线登陆操作方法

1、用緩衝(chong) 液將抗體(ti) 稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nei) 溶液，用洗滌緩衝(chong) 液洗3次。

2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml於(yu) 上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然後洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。

3、加酶標抗體(ti) ：於(yu) 各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(ti) (經滴定後的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4、加底物液顯色：於(yu) 各反應孔中加入臨(lin) 時配製的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鍾。

5、終止反應：於(yu) 各反應孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結果判定：可於(yu) 白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nei) 顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為(wei) 無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀(yi) 上，於(yu) 450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零後測各孔OD值，若大於(yu) 規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為(wei) 陽性。

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