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PCR技術服務,QPCR技術服務,RT-PCR技術服務

更新時間:2017-08-17      瀏覽次數:2073

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QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即實時熒光定量核酸擴增檢測係統,也叫實時定量基因擴增熒光檢測係統,簡稱QPCR。

 

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QPCR有以下特點:

檢測時間短,隻須45分鍾~1小時10分鍾(試劑各異),而定性PCR須3~4小時,酶免終點定量須6~8小時,熒光終點定量須2~3小時。

操作極其簡單:前處理後,樣本插入儀(yi) 器一小時後到電腦上來出報告即可,無須開蓋,移樣本(以前方法),避免汙染。

結果:定性PCR隻能定性,很粗略,終點定量PCR由於(yu) 隻能在40個(ge) 熱循環結束後檢測熒光,被測熒光達到飽和導致定量不夠,屬於(yu) 半定量狀態。而實時熒光QPCR是在擴增的每時每刻連續檢測各樣本的熒光值的變化,

聚合酶鏈式反應是一種用於(yu) 放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體(ti) 外的特殊DNA複製,PCR的zui大特點,是能將微量的DNA大幅增加。因此,無論是化石中的古生物、曆史人物的殘骸,還是幾十年前凶殺案中凶手所的毛發、皮膚或血液,隻要能分離出一丁點的DNA,就能用PCR加以放大,進行比對。這也是“微量證據”的威力之所在。由1983年美國Mullis首先提出設想,1985年由其發明了聚合酶鏈反應,即簡易DNA擴增法,意味著PCR技術的真正誕生。到如今2013年,PCR已發展到第三代技術。1973 年,中國台灣科學家錢嘉韻,發現了穩定的Taq DNA聚合酶,為(wei) PCR技術發展也做出了基礎性貢獻。
PCR(聚合酶鏈式反應)是利用DNA在體(ti) 外攝氏95°高溫時變性會(hui) 變成單鏈,低溫(經常是60°C左右)時引物與(yu) 單鏈按堿基互補配對的原則結合,再調溫度至DNA聚合酶zui適反應溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。基於(yu) 聚合酶製造的PCR儀(yi) 實際就是一個(ge) 溫控設備,能在變性溫度,複性溫度,延伸溫度之間很好地進行控製。

 

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