脯氨酸的鑒別與含量測定

脯氨酸鑒別

（1）取本品與(yu) 脯氨酸對照品各適量，分別加水溶解並稀釋製成每1ml中約含0.4mg的溶液，作為(wei) 供試品溶液與(yu) 對照品溶液。照其他氨基酸項下的色譜條件試驗，供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色應與(yu) 對照品溶液的主斑點相同。[5]

（2）本品的紅外光吸收圖譜應與(yu) 對照的圖譜（《藥品紅外光譜集》1041圖）一致。[5]

檢查

1酸度

取本品2.0g，加水20ml溶解後，依法測定（2010年版藥典二部附錄Ⅵ H），pH值應為(wei) 5.9～6.9。[5]

2溶液的透光率

取本品1.0g，加水10ml溶解後，照紫外－可見分光光度法（2010年版藥典二部附錄ⅣA），在430nm的波長處測定透光率，不得低於(yu) 98.0%。[5]

3氯化物

取本品0.25g，依法檢查（2010年版藥典二部附錄ⅧA），與(yu) 標準氯化鈉溶液5.0ml製成的對照液比較，不得更濃（0.02%）。[5]

4硫酸鹽

取本品1.0g，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅷ B），與(yu) 標準硫酸鉀溶液2.0ml製成的對照液比較，不得更濃（0.02%）。[5]

5銨鹽

取本品0.10g，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅷ K），與(yu) 標準氯化銨溶液2.0ml製成的對照液比較，不得更深（0.02%）。[5]

6其他氨基酸

取本品，加水溶解並稀釋製成每1ml中約含50mg的溶液，作為(wei) 供試品溶液；精密量取1ml，置200ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為(wei) 對照溶液。另取脯氨酸對照品與(yu) 蘇氨酸對照品各適量，置同一量瓶中，加水溶解並稀釋製成每1ml中各約含0.4mg的溶液，作為(wei) 係統適用性試驗溶液。照薄層色譜法（2010年版藥典二部附錄ⅤB）試驗，吸取上述三種溶液各2μl，分別點於(yu) 同一矽膠G薄層板上，以正丁醇－無水乙醇－濃氨溶液－水（8：8：1：3）為(wei) 展開劑，展開，晾幹，噴以茚三酮的丙酮溶液（1→50），在80℃加熱至斑點出現，立即檢視。對照溶液應顯一個(ge) 清晰的斑點，係統適用性試驗溶液應顯兩(liang) 個(ge) *分離的斑點。供試品溶液如顯雜質斑點，其顏色與(yu) 對照溶液的主斑點比較，不得更深（0.5%）。[5]

7幹燥失重

取本品，在105℃幹燥3小時，減失重量不得超過0.3%（2010年版藥典二部附錄Ⅷ L）。[5]

8熾灼殘渣

不得超過0.1%（2010年版藥典二部附錄Ⅷ N）。[5]

9鐵鹽

取本品1.0g，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅷ G），與(yu) 標準鐵溶液1.0ml製成的對照液比較，不得更深（0.001%）。

10重金屬

取本品1.0g，加水23ml溶解後，加醋酸鹽緩衝(chong) 液（pH 3.5）2ml，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅷ H*法），含重金屬不得超過百萬(wan) 分之十。

11砷鹽

取本品2.0g，加鹽酸5ml與(yu) 水23ml溶解後，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅷ J*法），應符合規定（0.0001%）。

12細菌內(nei) 毒素

取本品，依法檢查（2010年版藥典二部附錄ⅪE），每1g脯氨酸中含內(nei) 毒素的量應小於(yu) 10EU（供注射用）。

脯氨酸含量測定

取本品約0.1g，精密稱定，加冰醋酸50ml使溶解，照電位滴定法（2010年版藥典二部附錄ⅦA），用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，並將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當於(yu) 11.51mg的C5H9NO2。

體(ti) 內(nei) 代謝

在穀氨酰激酶(γ- GK)的作用下穀氨酸生成穀氨酰磷酸(γ-GP)，而後在穀氨酸一半醛脫氫酶(GSADH)的作用下生成穀氨酸一半醛(GSA)，GSA自發環化為(wei) 吡咯琳-5-羧酸(P5C)，在吡咯琳-5-羧酸還原酶(P5CR)的作用下還原為(wei) 脯氨酸。

　　脯氨酸在植物體(ti) 內(nei) 的降解基本上是合成過程的逆過程，這一過程首先發生在線粒體(ti) 中，脯氨酸在線粒體(ti) 中由脯氨酸脫氫酶(ProDH)催化，生成P5C，P5C在吡咯琳-5-羧酸脫氫酶(P5CDH)作用下生成穀氨酸，在植物受到滲透脅迫時，氧化降解的過程受到抑製，這樣細胞中脯氨酸含量增加，植物複水，此過程又會(hui) 被誘導，導致脯氨酸含量下降。

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