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更新時間:2017-07-14
瀏覽次數:1320上海信帆生物供應SUMO蛋白酶,產(chan) 品現貨供應,質量穩定,歡迎大家!
重組SUMO蛋白酶是通過通過酵母編碼的ΜlP1基因,在大腸杆菌中表達,經多次純化獲得。SUMO蛋白酶能夠識別並且地將SUMO(Small Ubiquitin-Like Modifier)從(cong) 融合蛋白上切割下來。相對於(yu) EK和TEV等蛋白酶的短小識別位點,SUMO蛋白酶能夠識別完整的SUMO序列,並依賴於(yu) 正確的蛋白質構象,所以SUMO蛋白酶不會(hui) 錯切融合的蛋白。SUMO蛋白酶的效力可維持在較寬範圍的反應環境體(ti) 係中,例如溫度(4~30℃)、pH(5.5~9.5)等。SUMO蛋白酶還具有多聚His標簽,便於(yu) 融合蛋白切割後的親(qin) 和層析純化。
使用建議:
因為(wei) 不同蛋白底物,SUMO蛋白酶的酶切效率會(hui) 有差異,可以在大量酶切前,先小量酶切測試在不同溫度下的酶切效率。
應用實例:
圖例一)SUMO蛋白酶酶切反應:每個(ge) 泳道含有15μg的目標蛋白與(yu) 20 U/mg比例進行SUMO酶切的上樣。在室溫(25℃)經過不同時間反應後用15%的SDS-PAGE膠檢測酶切效果。
每個(ge) 反應所用酶切時間分別為(wei) :
Lane 1: No Sumo蛋白酶
Lane 2: 5 units/mg
Lane 3: 10 units/mg
Lane 4: 20 units/mg
Lane 5: 蛋白Marker
活性定義(yi) :
在1×SUMO Protease Buffer(無鹽)反應體(ti) 係中(50mM Tris-HCl,pH 8.0,0.2% Igepal,1 mM DTT),加入1U SUMO Protease及5μg的反應底物(His-SUMO-GFP)補H2O至總體(ti) 積100μl,25℃條件下反應1小時,酶切效率達90%以上。
質量保證:
經多次柱純化,SDS-PAGE膠檢測僅(jin) 可見清晰單一的目的條帶;本製品不含有非特異性的蛋白酶切活性。
儲(chu) 存條件:
本SUMO蛋白酶的濃度為(wei) 5,000U/ml。儲(chu) 存於(yu) -20℃以下,避免反複凍融,可穩定保存一年以上。
For research use ONLY.
