大鼠白介素6（IL-6）elisa試劑盒太給力了

大鼠白介素6(IL-6)elisa試劑盒實驗原理

本試劑盒應用雙抗體(ti) 夾心法測定標本中大鼠白介素6(IL-6)水平。用純化的大鼠白介素6(IL-6)抗體(ti) 包被微孔板，製成固相抗體(ti) ，往包被單抗的微孔中依次加入白介素6(IL-6)，再與(yu) HRP標記的白介素6(IL-6)抗體(ti) 結合，形成抗體(ti) -抗原-酶標抗體(ti) 複合物，經過*洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素6(IL-6)呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠白介素6(IL-6)濃度。

大鼠白介素6(IL-6)elisa試劑盒標本要求

1．標本采集後盡早進行提取，提取按相關(guan) 文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放於(yu) -20℃保存，但應避免反複凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑製辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

大鼠白介素6(IL-6)elisa試劑盒操作步驟

 1加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘(yu) 各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為(wei) 5倍）。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

2溫育：用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。

3.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋後備用

4.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置30秒後棄去，如此重複5次，拍幹。

5.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

6溫育：操作同3。

7.洗滌：操作同5。

8顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鍾.

9終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

10.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液後15分鍾以內(nei) 進行。

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