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大鼠胰島素(INS)elisa試劑盒怎麽檢測

更新時間:2017-04-28      瀏覽次數:1079

大鼠胰島素(INS)elisa試劑盒基本信息簡介

胰島素是由胰髒內(nei) 的胰島β細胞受內(nei) 源性或外源性物質如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質激素。胰島素是機體(ti) 內(nei) *降低血糖的激素,同時促進糖原、脂肪、蛋白質合成。外源性胰島素主要用來糖尿病治療。

中文名 胰島素 外文名 Insulin 分子量 5807.69 分子式 C257 H383 N65 O77 S6     白色或類白色的結晶粉末     233℃(分解) 比旋度 -64°±8°(C=2,0.003mol/L NaOH) 酸堿度 兩(liang) 性,等電點pI5.35-5.45 化學本質蛋白質。

大鼠胰島素(INS)elisa試劑盒檢測方法簡介

1、用緩衝(chong) 液將抗體(ti) 稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml4 過夜。次日,棄去孔內(nei) 溶液,用洗滌緩衝(chong) 液洗3次。

2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml於(yu) 上述已包被之反應孔中,置37 孵育1小時。然後洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)

3、加酶標抗體(ti) :於(yu) 各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(ti) (經滴定後的稀釋度)0.05ml37 孵育0.51小時,洗滌。

4、加底物液顯色:於(yu) 各反應孔中加入臨(lin) 時配製的TMB底物溶液0.1ml37 1030分鍾。

5、終止反應:於(yu) 各反應孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結果判定:可於(yu) 白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nei) 顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為(wei) 無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀(yi) 上,於(yu) 450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零後測各孔OD值,若大於(yu) 規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為(wei) 陽性。

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