大鼠細胞間粘附分子1（ICAM-1）elisa試劑盒怎麽檢測

大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1)elisa試劑盒簡介

    ICAM-1（intercellular cell adhesion molecule-1 即細胞間黏附分子-1），又叫做CD54，屬於(yu) 黏附分子中免疫球蛋白超家族（IGSF）中的成員，是介導黏附反應重要的一個(ge) 黏附分子。ICAM-1 在靜息的血管內(nei) 皮細胞（VEC）上呈低水平表達，通過與(yu) 血管內(nei) 皮細胞表麵上的特異性受體(ti) 結合而發揮其生物學活性。作為(wei) 白血球和內(nei) 皮細胞跨膜的蛋白質，ICAM1在穩定細胞間相互作用和促進白血球和內(nei) 皮細胞的遷移起到重要作用。ICAM-1 的受體(ti) 有LFA-1(lymphocyte function associated antigen-1, 即淋巴細胞功能相關(guan) 抗原-1)和Mac-1，均屬於(yu) 整合素家族。LFA-1是ICAM-1 的主要受體(ti) ，而Mac-1與(yu) ICAM-1 的親(qin) 和力較低，纖維蛋白原也可成為(wei) ICAM-1 的配體(ti) 之一。

大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1)elisa試劑盒怎麽(me) 檢測

1、用緩衝(chong) 液將抗體(ti) 稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nei) 溶液，用洗滌緩衝(chong) 液洗3次。

2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml於(yu) 上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然後洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。

3、加酶標抗體(ti) ：於(yu) 各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(ti) (經滴定後的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4、加底物液顯色：於(yu) 各反應孔中加入臨(lin) 時配製的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鍾。

5、終止反應：於(yu) 各反應孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結果判定：可於(yu) 白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nei) 顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為(wei) 無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀(yi) 上，於(yu) 450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零後測各孔OD值，若大於(yu) 規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為(wei) 陽性。

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