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文章名稱《BMSCs移植對缺血性腦卒中大鼠IL-1β、TNF-a表達的影響》，主要講述骨髓間充質幹細胞（bone marrow mesenchymal stem ceIIs,BMSCs）移植治療大腦中動脈阻塞(Middle Cerebral Artery Occlusion，MCAO)模型鼠後，在不同時間點采用western blot、ELISA方法檢測IL-1β、TNF-α的表達變化，分析BMSCs移植對缺血性腦卒中後炎性因子的影響，探討BMSCs移植治療缺血性腦卒中修複受損神經功能的可能抗炎機製。 

文章中使用的大鼠IL-1β聯酶免疫試劑盒和大鼠TNF-a聯酶免疫試劑盒均有我司提供！

取幼年雄性SD大鼠骨髓腔細胞，通過全骨髓培養(yang) 法和細胞貼壁培養(yang) 法體(ti) 外分離、培養(yang) 、擴增得到BMSCs，傳(chuan) 至第4代，免疫熒光法鑒定，誘導分化為(wei) 成骨細胞、脂肪細胞及神經幹細胞並鑒定。

取成年雄性SD大鼠，用Longa線栓法製造MCAO模型。參考Bederson JB評分法測評大鼠神經功能缺損，篩選入組MCAO模型鼠；TTC染色法顯示腦組織梗死範圍，剔除TTC（-）或有出血的大鼠樣本。 　　

取造模成功的MCAO模型鼠*隨機分為(wei) 2組：A組/MCAO模型組（n=16），即建立MCAO模型後注射1ml生理鹽水；B組/實驗組（n=16），即建立MCAO模型後通過尾靜脈注射法移植1ml2×l09/L BMSCs；A、B組各分為(wei) 處理後1d、3d、7d、14d時間點亞(ya) 組（n=4）。

取正常大鼠設C組/空白組（n=4），不予任何幹預。各亞(ya) 組行心髒取血，ELISA方法檢測大鼠血清IL-1β、TNF-α的表達變化；生理鹽水灌注取腦，western blot方法檢測大鼠腦組織IL-1β、TNF-α的表達變化。

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結果 　　

1.成功培養(yang) 得到BMSCs。鏡下細胞形態：原代BMSCs呈圓形或類圓形，貼壁數量少；經過純化、擴增，貼壁細胞增多，呈長梭形，集落樣生長，局部呈漩渦狀；至P7代，細胞逐漸老化，以扁平細胞為(wei) 主。細胞免疫熒光法鑒定：CD54（+）、CD34（-），符合BMSC免疫表型特點。BMSCs誘導為(wei) 成骨細胞見細小顆粒於(yu) 培養(yang) 液；誘導為(wei) 脂肪細胞見紅色脂滴於(yu) 胞漿；誘導為(wei) 神經幹細胞見棕色顆粒於(yu) 胞漿。 　

2.大鼠神經功能評分：造模後1天實驗組評分較模型組無明顯差異（P>0.05），3天、7天、14天實驗組較模型組均有下降（P<0.05），差異有統計學意義(yi) 。 　　

3.大鼠血清IL-1β、TNF-α表達（單位：ng/L）：1天、3天、7天、14天各亞(ya) 組：IL-1β濃度為(wei) 模型組27.0±0.35、29.2±0.60、25.2±0.65、22.8±0.66，實驗組25.2±0.31、26.8±0.56、20.8±0.39、19.2±0.94，空白組10.9±0.54；TNF-α濃度為(wei) 模型組231±1.46、225±4.98、216±4.16、198±4.61，實驗組189±2.85、178±3.17、166±5.27、157±6.03，空白組146±6.86；

模型組較空白組均明顯增多（P<0.05），實驗組較模型組均減少（P<0.05），但較空白組仍增多（P<0.05）。模型組及實驗組與(yu) 空白組比較：IL-1β表達1天增多，3天達高峰，7天下降，14天持續下降，但仍高於(yu) 空白組（P<0.05）；TNF-α表達1天增多達高峰，3天下降，7天、14天緩慢下降，但仍高於(yu) 空白組（P<0.05），差異有統計學意義(yi) 。 　

4.大鼠腦組織IL-1β、TNF-α表達（灰度值）：1天、3天、7天、14天各亞(ya) 組：IL-1β為(wei) 模型組5502±108.9、6267±160.5、4425±158.1、3352±187.1，實驗組4217±143.7、4706±111.8、3235±150.7、2307±120.7，空白組1874±70.7；TNF-α為(wei) 模型組7801±148.9、6296±170.7、5399±240.9、3458±180.2；

實驗組6468±180.9、5789±119.7、4647±207.3、2828±152.6，空白組2215±159.5；模型組較空白組均增高（P<0.05），實驗組較模型組均降低（P<0.05）較空白組增高（P<0.05）。模型組及實驗組與(yu) 空白組比較：IL-1β表達1天增高，3天達高峰，7天下降，14天持續下降但仍高於(yu) 空白組（P<0.05）；

TNF-α表達1天增高達高峰，3天下降，7天、14天緩慢下降，但仍高於(yu) 空白組（P<0.05），差異有統計學意義(yi) 。 　　

結論 　

1.缺血性腦卒中模型鼠中IL-1β、TNF-α表達增加，其神經損傷(shang) 可能與(yu) 炎症反應有關(guan) 。 　

2.骨髓間充質幹細胞移植可降低MCAO模型鼠IL-1β、TNF-α的表達，其修複神經功能的作用可能與(yu) BMSC下調炎性因子減輕炎症反應

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