ky体育在线登陆檢測細胞因子知多少

  從(cong) 21世紀初期，由於(yu) 免疫學研究中一個(ge) 非常活躍的領域就是細胞因子的研究，它的檢測成為(wei) 現代生物科學研究的重要方麵。國內(nei) 的生物廠家，運用抗原、抗體(ti) 反應的原理已研製出了高靈敏度（sensitive）、高特異性、高度配套的細胞因子檢測試劑盒，生物試劑的檢測試劑盒涵蓋幾乎所有的細胞因子。依據檢測方法不同，可分為(wei) ELISA測定（酶聯免疫）和放射免疫測定。

1. 放射免疫測定

  放射免疫測定是將同位素分析的高靈敏度與(yu) 抗原抗體(ti) 反應的特異性相結合，方法大多采用競爭(zheng) 法原理。待檢的細胞因子與(yu) 放射性同位素標記的細胞因子競爭(zheng) 與(yu) 細胞因子抗體(ti) （多克隆抗體(ti) 或單克隆抗體(ti) ）結合，再通過分離劑分離結合狀態的標記物，計數後根據標準曲線即可計算出細胞因子的量。本法具有靈敏度高（可檢測出ng甚至pg水平），特異性強、準確性好等特點。

2.ELISA測定

2-1.

  酶聯免疫斑點（ELISPOT） 檢測試劑盒是基於(yu) 定量夾心ELISA法原理，將刺激後的細胞滴加到包被在貼PVDF微孔中，放置於(yu) 37℃孵育。在孵育的過程中，細胞分泌的細胞因子即會(hui) 被包被的抗體(ti) 所捕獲，以下的過程與(yu) 一般的ELISA實驗相同，zui後用不溶性的酶聯底物進行顯色，每一個(ge) 顯色點（斑點）既代表一個(ge) 分泌細胞因子的細胞。通過的ELISPOT分析儀(yi) 或在顯微鏡下進行計數，就可以進行分析。ELISPOT法用於(yu) 檢測單個(ge) 細胞分泌的細胞因子，綜合了普通ELISA方法的高特異性和準確定量的優(you) 點，而且具有生物活性分析得出與(yu) 功能相關(guan) 的結果的優(you) 點。

2-2.

  雙抗夾心ELISA法 雙抗體(ti) 夾心法需製備針對細胞因子不同位點的兩(liang) 個(ge) 單克隆抗體(ti) ，一個(ge) 抗體(ti) 作為(wei) 固相抗體(ti) 用於(yu) 包被，另一個(ge) 作為(wei) 標記抗體(ti) 。可采用常規雙抗夾心法，也可采用一步法。由於(yu) 血清中細胞因子的含量很低。常規ELISA法不能滿足要求，需引入生物素－親(qin) 合素係統來提高靈敏度，即加入樣品後加入生物素標記的另一個(ge) 抗體(ti) ，再加入親(qin) 合素及生物素化的酶，再加入底物進行顯色，顏色與(yu) 待檢的細胞因子量呈正比。

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