影響ELISA實驗結果的外在因素及解決方法

信帆生物為(wei) 大家分享：外源性ELISA結果出錯解決(jue) 方案:

外源性物質幹擾解決(jue) 方案：

外源性物質常常是由於(yu) 用於(yu) ELISA 測定的血標本的采集、貯存等不當所致。如標本溶血、標本被細菌汙染、標本貯存過久、標本凝集不全和采血管中添加物等影響。

（1）標本溶血  由於(yu) 各種人為(wei) 原因引起的標本溶血，均可因紅細胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為(wei) 標記的 ELISA 測定中，會(hui) 導致非特異性顯色，幹擾測定結果。為(wei) 克服上述幹擾作用，標本采集時必須注意避免溶血。

（2）標本受細菌汙染  因菌體(ti) 中可能含有內(nei) 源性辣根過氧化物酶，因此，被細菌汙染的標本同溶血標本一樣，亦可產(chan) 生非特異性顯色而幹擾測定結果（信帆生物）。

（3）標本保存不當  在冰箱中保存過久的標本，血清中 IgG 可聚合成多聚體(ti) 、AFP 可形成二聚體(ti) ，在間接法 ELISA 測定中會(hui) 導致本底過深、甚至造成假陽性；標本放置時間過長（如一天以上），有時抗原或抗體(ti) 免疫活性減弱，亦可出現假陰性。為(wei) 克服上述幹擾，ELISA 測定的血清標本宜為(wei) 新鮮采集；如不能立即測定，5 天內(nei) 測定的血清標本可存放於(yu) 4℃，1 周後測定的血清標本應低溫凍存；凍存後融解的標本，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混合後再測定，但混勻時應輕柔，（上海信帆生物）不可強烈振蕩。

（4）標本凝集不全  在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下，正常血液采集後 1/2~2 h 開始凝固，18~24 h *凝固。上海信帆生物提供ELISA樣本收集方法。研究檢驗工作中，有時為(wei) 了爭(zheng) 取時間快速檢測，常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清，此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在 ELISA 測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結果；這類情況於(yu) 次日複查時因血凝已*，血清中不再有纖維蛋白原存在，故複查結果變為(wei) 陰性。為(wei) 避免上述幹擾作用，解決(jue) 的辦法是血液標本采集後必須使其充分凝固後再分離血清，或標本采集時用帶分離膠的采血管或於(yu) 采血管中加入適當的促凝劑。

（5）標本管中添加物質的影響  抗凝劑（如肝素，EDTA）、酶抑製劑（如 NaN3 可抑製 ELISA 係統中辣根過氧化物酶活性）及快速分離血清的分離膠等均對 ELISA 測定有一定幹擾作用。 綜上所述，對研究檢驗 ELISA 測定中出現的假陽性或假陰性結果，在考慮試劑因素和操作因素之外，更多的應從(cong) 標本因素方麵進行分析，並應采取相應措施排除 幹擾作用，從(cong) 而為(wei) 研究提供正確可靠的檢測結果。

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