免疫組化組織樣本的處理方法！

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組織處理
恰當的組織處理是做好免疫組化染色的先決(jue) 條件，也是決(jue) 定染色成敗的內(nei) 部因素，在組織細胞材料準備的過程中，不僅(jin) 要求保持組織細胞形態完整，更要保持組織細胞的抗原性不受損或彌漫，防止組織自溶。如果出現自溶壞死的組織，抗原已經丟(diu) 失，即使用很靈敏的檢測抗體(ti) 和高超的技術，也很難檢出所需的抗原，反而往往由於(yu) 組織的壞死或製片時的刀痕擠壓，在上述區域易出現假陽性結果。
1) 組織及時取材和固定
組織標本及時的取材和固定是做好免疫組化染色的關(guan) 鍵*步，是有效防止組織自溶壞死，抗原丟(diu) 失的開始，離體(ti) 組織應盡快的進行取材，2h內(nei) ，取材時所用的刀應銳利，要一刀下去切開組織，不可反複切拉組織，造成組織的擠壓，組織塊大小要適中，一般在2.5cm×2.5cm×0.2cm，切記取材時組織塊寧可麵積大，千萬(wan) 不能厚的原則，(也就是說組織塊的麵積可以大到3cm×5cm，但組織塊的厚度千萬(wan) 不能超過0.2cm，否則將不利於(yu) 組織的均勻固定)。固定液快速滲透到組織內(nei) 部使組織蛋白能在一定時間內(nei) 迅速凝固。從(cong) 而完好的保存抗原和組織細胞形態。

對於(yu) 固定液的選擇，原則上講，應根據抗原的耐受性來選擇相應的固定液，但除非是專(zhuan) 項科研項目，在病理常規工作很難做到這一點，因為(wei) 病理的診斷和鑒別診斷都是在常規HE病理診斷的基礎上決(jue) 定是否進行免疫組化的染色，而HE染色的常規組織處理是采用10%的中性緩衝(chong) 福爾馬林或4%緩衝(chong) 多聚甲醛4倍於(yu) 組織體(ti) 積進行組織固定，利用其滲透性強，對組織的作用均勻進行固定，但組織固定時間在l2h內(nei) ，一般固定時間不應超過24小時。隨著固定時間的延長對組織抗原的檢出強度將逐漸降低。

2) 組織脫水、透明、浸蠟
組織經固定後進行脫水、透明、浸蠟和包埋。掌握的原則是脫水透明要充分但不能過，浸蠟時間要夠，溫度不能高，否則造成組織的硬脆使組織切片困難，即使能切片，由於(yu) 組織的硬脆，也使切片不能完好平整，染色過程中極易脫片，對免疫組化染色抗原的定位及背景都不利，所以*脫水和二甲苯透明的時間不宜過長，正常大小的組織*脫水lh×3次，二甲苯透明lh×2次即可，浸蠟及包埋石蠟溫度不要超過65℃。
免疫組化實驗代測之免疫組化的樣本處理切片染色注意事項

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