信帆生物新品上市：神經肽Y 放免代測服務供應

信帆生物新品上市：神經肽Y 放免代測服務供應！

神經肽Y 放免藥盒操作說明書(shu)
NPY RIA KIT
神經肽Y(Neuropetide NPY)是一種含有36 個(ge) 氨基酸殘基的多肽。廣泛分布於(yu) 哺乳動物的中
樞神經係統。NPY 可收縮血管，升高血壓，對心髒表現為(wei) 負性肌力作用。zui近有作者證實血小
板有合成NPY 的能力。NPY 含量與(yu) 應激反應程度有關(guan) ，當出血性休克時，NPY 釋放增加對維
持全身血壓穩定和調節器官血流量具有重要的代償(chang) 作用。研究各種病理狀態血漿及血小板NPY
含量與(yu) 釋放的改變及其病理生理意義(yi) ，對心腦血管疾病的防治具有廣闊的研究前景。
測定盒組成：
1、緩衝(chong) 液一瓶。
2、分離劑（第二抗體(ti) ）一瓶。
3、NPY 抗體(ti) 一瓶，用前加ml 緩衝(chong) 液稀釋。
4、NPY 標記一瓶，用前加ml 緩衝(chong) 液稀釋。
5、NPY 標準品五瓶：用前每瓶加ml 緩衝(chong) 液稀釋33、100、300、600、1200pg/ml。
6、抑肽酶一瓶。
7、10%EDTA.Na2 一瓶。
樣品收集：
1、取靜脈血3ml 注入含10%EDTA.Na2 40ul 和抑肽酶10ul（含100U/ml 以上）的試管中，
混勻4℃，3000 轉/分離心10 分鍾，分離血漿（溶血樣品影響測定結果）。如需要可分裝2-3
份保存，放-20℃可保存2 個(ge) 月，在-70℃以下可存放半年。測定前，使樣本置於(yu) 室溫或冷水中
複融，再次4℃，3000 轉/分離心5 分鍾，取上清測定。
2、組織樣品的處理：取出活組織，吸去血跡，稱重，放入0.2mol/L 1N HAC 1ml 中，然後
在100℃水浴中煮沸10 分鍾，勻漿。4℃，3000 轉/分離心15 分鍾，取上清放-20℃以下保存，
測定時用PBS 五倍以上稀釋，以調節PH 值。另外，每種組織的樣品非特異結合（U0）可能有
差異，每份標本zui單獨做一個(ge) U0。取組織的重量視不同組織而異。
3、血漿樣品處理：實驗結果發現：有少數患者可能由於(yu) 使用某些藥物或個(ge) 體(ti) 差異，出現血漿
蛋白對抗原抗體(ti) 反應的影響，測定NPY 值偏低，甚至為(wei) 零。為(wei) 排除樣品中蛋白質的幹擾，可采
用簡易酸性乙醇提取法，
具體(ti) 步驟如下：
取血漿0.5ml+1ml 酸性無水乙醇（ 100ml 無水乙醇+冰乙酸1.2ml），放振蕩器上振蕩1min，4℃，
3500rpm/15min 離心15min，將上清液倒入青黴素瓶，在45℃水浴鍋上蒸幹（可將水浴鍋溫
度調到80℃左右，鍋口上放一鋁板，鋁板上溫度約40~45℃，將青黴素瓶置於(yu) 鋁板之上），大
約需24 小時樣品可以*幹燥，幹燥後將青黴素瓶加蓋，封口，放-20℃保存。
測定前，每瓶加PH7.4 PBS 0.5ml 溶解，混勻，倒入塑料管中，放-20℃ 4h 以上至樣品*
凍結，然後取出放置4℃*溶解，取上清200ul 測定用。
注：從(cong) 4℃取出後，一定要輕拿輕放，千萬(wan) 不要再振蕩混勻，不要在室溫放置過久，現加現
取。
測定方法：本實驗采用非平衡法，取聚苯乙烯編號，按下表操作。
NPY RIA 操作程序（單位：ul）
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試劑T NSB S0 S1~S5 樣品
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緩衝(chong) 液—— 300 200 —— ——
標準品—— —— —— 200 ——
樣品—— —— —— —— 200
抗體(ti) —— —— 100 100 100
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搖勻，4℃ 48 小時
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125I-NPY 100 100 100 100 100
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搖勻，4℃ 24 小時
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分離劑—— 500 500 500 500
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混勻，室溫放置20 分鍾，4℃3500 轉/分離心25 分鍾，去上清，測定沉澱cpm 值。
結果計算：
以N/T、B/T 計算NSB、S0 結合百分率，以B/B0 計算標準及待測物結合百分率，
在半對數座標紙上繪製標準曲線，並查出樣品值或由自動Υ-計數儀(yi) 器直接讀出結果。
注：測兔標本時，應改用20%PEG500ul/管分離。同時向NSB、S0、S1~S5 管
加Υ球蛋白液100ul/管；U、U0 管加緩衝(chong) 液100ul/管。
本試劑盒主要技術參數：
特異性：抗血清與(yu) 7 種常見的多肽類化合物的交叉反應<1%。
靈敏度：<33pg/ml。可測範圍：33~1200 pg/ml。
精密度：批內(nei) CVW<10%，批間CVb<15% 。
有效期：本藥盒4~8℃，保存有效期35 天。
正常參考值：145.1±44.1 pg/ml。