皮質醇放射免疫試劑盒-現貨供應

上海信帆生物代理銷售皮質醇放射免疫試劑盒，除此之外我們(men) 還代理銷售美國鳳凰，索靈等進口放免代測服務，谘詢！

皮質醇放射免疫試劑
該藥盒定量檢測血清、血漿及尿液中皮紙醇的水平。
摘要：
皮質醇是腎上腺皮質分泌的zui主要的糖皮質激素，其生理效應為(wei) 抗炎症活
性，維持血壓和由蛋白合成糖的過程。
糖皮質激素在促腎上腺皮質激素（ACTH）的刺激下合成。ACTH 由垂體(ti) 前
葉分泌。在一般個(ge) 體(ti) 中，ACTH 存在時，皮質醇通過下丘腦-垂體(ti) -腎上腺皮質這
個(ge) 軸線（HPA 軸線）參與(yu) 一個(ge) 負反饋循環，而垂體(ti) ACTH 是受下丘腦分泌的ACTH
釋放因子（CRF）調控的，下丘腦CRF 受皮質醇水平的影響產(chan) 生應激。生理及
心理上的應激，晝夜變化和低血糖又影響著皮質醇的分泌速度。
HPA 軸上每個(ge) 器官出現問題都會(hui) 導致皮質醇水平發生變化，用血清或血漿
中皮質醇的水平來衡量腎上腺功能狀況有助於(yu) 常規和非常規診斷。早晚檢測與(yu) 刺
激和抑製試驗結合起來可為(wei) 特殊的腎上腺疾病診斷提供有利依據。阿狄森氏病
（慢性腎上腺皮質機能減退症）以及柯興(xing) 氏綜合症（腎上腺皮質分泌過盛）的診
斷就是循環中皮質醇水平的特異分析有助於(yu) 診斷的兩(liang) 個(ge) 例子。
方法原理：
該方法以放射免疫測定的競爭(zheng) 性結合原理為(wei) 基礎。標準品和未知樣品包被管
中一起溫育，抗體(ti) 包被於(yu) 試管底部。溫育後將管內(nei) 物質吸出或倒出，計數。在1～
60μg/dl 範圍內(nei) ，以5 個(ge) 血清標準坐標準曲線，未知樣品值可從(cong) 標準曲線中查得。
整個(ge) 反應在包被管中進行。對於(yu) 血清，尿液或血漿樣本來說，未分離樣本的稀釋，
蛋白質的變性或提取步驟是必須的。
除了非提取尿皮質醇分析外，該藥盒也可用於(yu) 尿液中遊離皮質醇的測定。首
先用亞(ya) 甲基氯化物提取尿液中皮質醇，將提取物的一個(ge) 等份式樣在包被管中直接
脫水（試驗證明如果使用的亞(ya) 甲基氯化物，不會(hui) 有損於(yu) 包被管）。為(wei) 確保樣
本中含有適當水平的蛋白質，向每個(ge) 包被管中加入10μl 皮質醇血清空白，其餘(yu)
測定過程同血清，血漿和非提取尿皮脂醇。應監控使用亞(ya) 甲基氯化物提取尿中皮
)
質醇的效率。
試劑：
規格：CA-1529-100T
CA-1549-500T
緩衝(chong) 液的介紹看試劑製備部分。所有試劑（包括緩衝(chong) 液）在2～8℃下貯存，
保質期內(nei) 是穩定的。包被管可貯存在2~27℃，不要使用過期試劑。每一藥盒的
組分首先指的是100T，然後指的是500T。
1. 125I 皮質醇標記物
Cat.No. CA-2649
每盒1 瓶/5 瓶
每瓶有10ml 磷酸鹽緩衝(chong) 液，內(nei) 含大約4μCi 標記物（<1μg/ml 皮質醇）,
以0.1%爹氮化鈉作為(wei) 防腐劑的ANS（8-Anili-萘磺酸）。
2. 兔抗皮質醇血清包被管
Cat.No. CA-2167
每盒100T/500T
12×75mm 包被管，並用一塑料包包裝。
3. PBS 緩衝(chong) 液
Cat.No. CA-2715
每盒1/5
每小瓶含有100ml 磷酸鹽緩衝(chong) 液，0.1%*作為(wei) 防腐劑。
4. 皮質醇血清空白
Cat.No. CA-236
每小瓶含1ml 處理過的科研血清，0.1%*作為(wei) 防腐劑。
5. 皮質醇血清標準
Cat.No. CA-2358，CA-2359，CA-2370，CA-2371，CA-2372
每盒1/5
每小瓶有1ml 處理過的血清，內(nei) 含皮質醇，0.1%*作為(wei) 防腐劑，所
供標準品濃度如下：分別為(wei) 1、3、10、25 和60μg/dl
6. 備用標簽
每盒1/5
7. 可選
半對數繪圖紙
每盒50 張。
警告和預防措施
用於(yu) 體(ti) 外診斷
不適於(yu) 人和動物外服或內(nei) 用。
潛在傳(chuan) 染源的處理：
在製備本產(chan) 品中所使用的每一血清和血漿捐獻者單位，均已采用FDA 提供
的方法測試過，發現對存在的HbsAg，HCV 抗體(ti) 和HIV 抗體(ti) 均無反應。盡管這
些方法具有高度的準確性，但也無法保證能發現所有的感染單位。本產(chan) 品仍可能
含有其他能通過測試的人源物質。因此，沒有已知的測定方法可以給出滿意的保
證（既保證不存在乙肝病毒，丙肝病毒和HIV 病毒或其他傳(chuan) 染因素），因而其
使用和運輸必須在良好的實驗規程和適當的防衛措施下，按照國家相關(guan) 政策進
行。
含*的試劑：
警告：本藥盒中部分試劑含有*，*可與(yu) 含銅、鉛的裝置反應
形成易爆炸的金屬疊氮化物，其處理是衝(chong) 入大量的水以防止疊氮化物的積聚，更
進一步的資料參閱“Decontamination of Laboratory Sink to Remove Azide Salts”
含125I 的試劑：
此試劑含有放射性物質，其運輸和使用應在適當的防護措施及良好的實驗規
程下進行。
1 其貯存應被限製在特定地點
2 對其接近限定為(wei) 被授權本人
3 禁止用嘴吸取放射性物質
4 禁止在放射性工作地點吃飯或飲水
5 擦淨可能發生溢出的地方，再用堿性去汙劑或放射性去汙溶液清洗。任何
使用過的玻璃器具在清洗其它實驗室玻璃器具前，必須用清水*清洗幹淨。
領取從(cong) 事放射性的實驗人員或機構應持有的特定許可證
警告：此產(chan) 品含有加利福尼亞(ya) 州所知的致癌物
注意：印於(yu) 包裝上的放射性與(yu) 印於(yu) 盒子標簽及標記物小瓶標簽上的放射性有
輕微區別。盒子標簽和標記物小瓶標簽表明校準日起的準確放射性數量，而包
裝上表明的是試劑盒的理論放射性數量。
試劑的配製：
將小瓶內(nei) 的標記物加入到1 瓶磷酸鹽緩衝(chong) 液中，充分混勻後，用混合液衝(chong) 洗
標記物瓶以zui大限度的轉移標記物。將混合液裝入易識別的容器中，貼上備用標
簽，將其置於(yu) 黑暗中保存或用金屬箔包裹，溫度控製在2~8℃。
樣品要求：
樣品的收集和處理：
血漿樣本：
靜脈取血放在含有肝素或DETA 的試管中，分理處小分血漿，2~8℃冷藏可過
夜，長時間則學–20℃凍存。避免使用溶血、脂血和黃疸性血樣。
血清樣本：
盡管皮質醇檢測通常使用血漿樣本，但也可使用血清樣本獲得相似結果。
靜脈取血放在試管中，不用任何添加劑。分離出血清部分，2~8℃冷藏可過一夜
長時間則學–20℃凍存。避免使用溶血、脂血和黃疸性血樣。
尿樣：
收集24 小時尿樣，記下尿的容量，每升尿添加10 克硼酸作為(wei) 防腐劑，充分混
勻後–20℃凍存。使用前，室溫融化樣本並充分混勻。
檢測過程：
成功使用該藥盒，必須*理解該部分內(nei) 容，嚴(yan) 格按照文中所述，仔細操作
實驗每一步以獲得可靠結果。藥盒各部分都作為(wei) 整體(ti) 單位使用。許多部分單個(ge) 測
定不能混用。不能使用過期藥盒。每一次檢測都必須做一條標準曲線。
未提供需自備的材料：
1. 恒溫水浴鍋，37±2℃
2. 10μl 吸管
3. 1.0ml 半自動吸管
4. γ-計數儀(yi)
5. 檢測用試管架
6. 抽水器（可選）
7. 渦旋混勻器
8. 吸紙（可選）
尿樣檢測時使用的材料：
1. 隨時可用的玻璃試管（12×75mm）和試管帽
2. 二氯甲烷（二氯甲；美國化學學會(hui) 分析試劑等級）
3. 水壺
4. 100μl 、200μl 吸管
5. 通風櫥或通風良好的工作區
6. 蒸發二氯甲烷，其意義(yi) 在於(yu) 產(chan) 生一股幹燥的空氣或氮氣是提取物緩緩升溫
至37℃
尿樣提取過程
該過程包括監測二氯甲烷抽取效率的方法。在INCSTAR 實驗室裏，典型
的尿樣中回收皮質醇為(wei) 99±14%
1. 在壺裏放一個(ge) 適當的二氯甲烷容器使之冷卻，每管許可放1ml。水壺應
足夠大以容納二氯甲烷的燒杯和提取血樣試管的架子
2. 為(wei) 檢測提取效率，用樣本的標簽給每個(ge) 試管做標記，一管標上“S”（樣本），
另一管標上“E”（提取效率）
3. 分別向“S”管和“E”管加入200μL 24 小時尿樣
4. 隻向”E”管加10μl 濃度為(wei) 60μg /ml 24 皮質醇血清標準CA-2372，震蕩
試管架，混勻試劑或每管單獨混勻。
5. 向各個(ge) “S”管和“E”管加上1ml 冷卻的二氯甲烷，充分渦旋混勻，提
取皮質醇到有機層，蓋上帽或放在壺裏以避免二氯甲烷過渡蒸發，為(wei) 更
好的用吸管轉移乙氯甲烷，在轉移前，用冷的二氯甲烷清洗試管3~4 次
6. 等待分離的這段時間裏，給每個(ge) “S”管和“E”管標記好兩(liang) 個(ge) 皮質醇包
被管.
7. 分離階段後，仔細小心的從(cong) 每管有機層（二氯甲烷）底部吸取100μl 並
加到標記好的包被管中，吸取樣本前，用冷的二氯甲烷衝(chong) 洗吸管頭，將吸
管頭樣本的滲出量減到zui小，轉移100μl 提取液時，不要試圖擦拭吸管
頭，否則會(hui) 因二氯甲烷的特性會(hui) 引起吸管頭部溶液產(chan) 生氣泡
小心的向包被管轉移提取液，用一隻手抓住包被管和提取管，快速小心的
吸取100μl 至包被管的底部
8. 伴隨著一股幹燥的空氣和氮氣，二氯甲烷從(cong) 包被管底部蒸發，提取物緩緩
升溫至37℃
警告：工作區避免過多霧狀鹵化烴產(chan) 生
提取隻能在通風處或通風良好的工作區進行
9. 二氯甲烷蒸發後，向每個(ge) 帶有樣本樣本的包被管（“S”管和“E”）加入
10μl 皮質醇血清空白，CA-2367,以使每個(ge) 樣本都包括適當水平的蛋白質
10. 有檢測過程的*步繼續放免操作
檢測過程：
包括繪製標準曲線，從(cong) 曲線上可查得未知樣本皮質醇的含量
1. 將所有試劑恢複到室溫，使用前充分混勻.，不可有氣泡產(chan) 生
2. 將標記好的包被管按如下所述安置。總管（T1,T2）和B0 管（1，2）對
於(yu) 確鑿的數據變化和質控程序是必需的，但如果在半對數繪圖紙上作標
準曲線，二則是可省略的
3. 加樣至包被管底部
a. 10μl 皮質醇血清空白，或每個(ge) 血清皮質醇標準
b. 加10μl 樣本（血清、血漿和非提取尿樣），仔細小心的吸取標準
樣本。
c. 對於(yu) 提取尿樣，使用包被管，管中含有經過9 步尿提取操作而得的
提取尿
注：若要求稀釋病科研血清或血漿樣本，藥盒提供的皮質醇血清空白
可作稀釋劑，提取和非提取尿樣可用蒸餾水稀釋，對於(yu) 尿遊離
皮質醇吸取200μl 稀釋尿樣（尿提取過程步驟3），常規檢測
繼續進行，計算結果應將稀釋因素考慮進去。
4. 每管加入1.0ml 標記-緩衝(chong) 混合液，低速渦旋混勻。
5. 水浴鍋中37±2℃溫育45 分鍾。
6. 除總管外，吸出或傾(qing) 析所有試管
若用抽吸技術，一定要將吸管的塑料頭接觸到包被管底部將液吸出
若用傾(qing) 析技術，允許將試管傾(qing) 倒3~5 分鍾排液，試管向上前在試紙上輕
嗬試管，移出粘附液體(ti) 。
7. 所有管在γ-計數儀(yi) 上計數1 分鍾（注意測的是125I ）
8. 計算、提交結果
插圖略
標準：
本藥盒中的皮脂醇標準都對照美國提及的皮脂醇標準進行了校
準。其他產(chan) 品和過程都是以該標準作對照。
質控
每個(ge) 實驗室都應采用不同濃度的質控監控檢測進行。質控品應按未知
樣本來對待，保持質控記錄。哥哥實驗室都應確定自己的質控。
結果
未知血清、血漿和未知尿樣可同時檢測，用內(nei) 插法從(cong) 標準曲線上查出
結果，標準曲線由皮脂醇標準品繪製。非提取尿皮脂醇樣本（UC）和提取尿
遊離皮質醇樣本（UFC）在用公式換算到“μg /24hr”
1. 記錄各管的每分鍾計數（CPM）
2. 皮質醇標準品計數為(wei) 縱坐標，以相對應的皮脂醇濃度為(wei) 橫坐標，在半
對數繪圖紙上製圖
3. 畫出標準曲線，例子見表1 和圖1
4. 確定每個(ge) 樣品各管計數在縱坐標上的位置，畫一條水平橫線與(yu) 標準曲
線相交，在這個(ge) 交點，讀出相對應的橫坐標上的皮脂醇濃度。（μg /dl）
非提取尿皮脂醇：
將非提取尿樣的皮脂醇濃度（UC）從(cong) μg /dl 換算到μg /24hr，使用如下公
式：
S×V
UC= ———
100
S：非提取尿樣濃度（μg /dl）
V：總尿容量（ml/24hr）
100：換算因子
提取尿遊離皮質醇：
將UFC 從(cong) μg /dl 換算到μg /24hr，使用如下公式：
S×V
UFC= —————
33.3(E-S)
S：提取尿樣濃度（μg /dl）
E：符合樣效率管的濃度（μg /dl）
V：總尿容量（ml/24hr）
33.3：結合了稀釋和提取因素的換算因子
對於(yu) 每個(ge) 實驗室來說，都希望監控尿提取過程（EE）的效率，按下麵公
式計算出效率的百分比
E-S
EE= ———×100
6.0
S：提取尿樣濃度（μg /dl）
E：符合樣效率管的濃度（μg /dl）
6.0：“S”管和“E”管濃度間的預期差值
100：換算因子
單位
把血清標準品、質控和樣本樣本（血清和血漿）值乘以27.59（見表1 所列
皮質醇標準的兩(liang) 種單位值），使用362.5 道爾頓分子量，從(cong) μg /dl 換算到單
位nmol/ml。同樣，提取和非提取尿質控和樣本值乘以2.76，將μg /24hr 換算到
單位nmol/24hr .
過程的局限性
過程中
標記-緩衝(chong) 混合液必須避光保存。包被管又接收至使用前應2~7℃保存，保存未
用管時應將塑料包裝安全的封閉好，以防止冷凝現象。
溫育條件應按照程序檢查，水域鍋溫度必須保持在37±2℃，而且水麵要高於(yu) 試
管內(nei) 溶液，但不可淹沒試管。
操作者應注意到錯誤結果可能由不正確貯藏和處理樣本所致，避免使用溶血、脂
血和黃疸性血樣。
未能獲得正確的質控皮質醇濃度意味著操作不、處理不當或試劑變質。每次
檢測都要作質控，每次檢測都要繪製標準曲線。
本藥盒不能用於(yu) 測定正在用氫化潑尼鬆治療的樣本的血清（參見闡述）
闡述
總的來說，皮質醇水平上午5~10 點zui高，下午8 點至淩晨4 點zui低。上午水平
通常是下午水平的1/2 或1/3。女性一天中皮質醇水平的變化，攝入食物時升高
而喪(sang) 失食物時顯著減少，這一點已有所描述。晝夜變化，刺激和抑製試驗、各種
壓力都會(hui) 使皮質醇濃度發生變化，例如：甲狀旁腺激素刺激會(hui) 使皮質醇濃度升至
上午水平的2~3 倍。甲毗酮或地塞米鬆抑製會(hui) 使上午水平不超過5μg /dl。雌激
素作為(wei) 口服避孕藥會(hui) 引起血漿或血清蛋白中皮質醇水平升高。因此，每個(ge) 樣本的
皮質醇值以他/她上午皮質醇水平為(wei) 準。
正常參數值
血漿或血清水平
早晨：7~25μg /dl 獲70~250ng/ml (193~690nmol/ml)
晚上：2~9μg /dl 獲20~90ng/ml (55~248nmol/ml)
在每個(ge) 實驗室確立自己的正常範圍前，這些範圍作指導用。
非提取尿皮質醇：
非提取尿樣的尿皮質醇的正常範圍為(wei) 75~270 μg /24hr（207~745nmol/24hr）。尿
樣收集不當可導致錯誤的樣本結果，建議測定肌酸酐以鑒別尿樣收集是否合適。
提取尿樣遊離皮質醇
尿遊離皮質醇的正常範圍為(wei) 20~80μg /24hr 皮質醇（55~248nmol/24hr）。尿樣收
集不當可導致錯誤的樣本結果，建議測定肌酸酐以鑒別尿樣收集是否合適。
靈敏度：zui低可測濃度為(wei) 0.21μg /dl
親(qin) 和力：皮質醇抗血清的親(qin) 和常數近似為(wei) 2×108 liter/mol
特異性：如下化合物使用皮質醇放射免疫法測定其交叉反應，是皮質醇濃度恰
為(wei) 抑製50%時，比較各類混合物的交叉反應。
化合物%交叉反應
皮質醇100
潑尼鬆77
6-甲強的鬆龍43
11-脫氧皮質醇6.3
17-烴孕酮1.2
皮質酮<0.4
地塞米鬆0.2
氫化潑尼鬆0.2
脫氫皮質酮0.1
四氫皮質酮0.1
醛固酮<0.1
可的鬆<0.1
雙氫皮質酮<0.1
孕酮<0.1
四氫皮質酮<0.1
6-β-皮質醇<0.1