
PRODUCT CLASSIFICATION
產品分類
更新時間:2015-05-26
瀏覽次數:970IgM類單克隆抗體(ti) 純化試劑盒使用說明書(shu)
立可純C080202(50ML純化量)
試劑原理:
本試劑盒利用不同類別免疫球蛋白結構特性,通過大量實驗分析驗證而得到的一個(ge) 與(yu) 傳(chuan) 統純化*不同的精細的具有高活性、高產(chan) 率、快速以及良好重複性的單克隆抗體(ti) 的純化方法,本試劑盒所用材料對人體(ti) 沒有損害,安全環保。
試劑特點:
本試劑盒特點在於(yu) 純化操作的簡單化、所得抗體(ti) 的高活性和高純度。實驗表明,本試劑盒可以得到95%左右純度的抗體(ti) ;並且由於(yu) 配方考究,抗體(ti) 在純化過程中幾乎沒有損傷(shang) ,*保持應有的活性,實際應用*。
適用範圍:
本試劑盒僅(jin) 適用於(yu) 小鼠IgM類單克隆抗體(ti) 腹水的純化,不能用於(yu) 其它Ig類或亞(ya) 類單克隆抗體(ti) 腹水的純化實驗,如需要可選擇立可純係列其它貨號的純化試劑,它能為(wei) 您帶來滿意結果。
試劑組成:
試劑名稱 | 數量 | 試劑名稱 | 數量 |
純化液A | 65ml | 30X濃縮透析液 | 150ml |
純化液B | 50mL | 透析袋 | 1根 |
純化液C | 30mL | 說明書(shu) | 1份 |
純化液D | 40mL | 空白不幹膠標簽 | 2片 |
純化步驟:
1、將單克隆抗體(ti) 腹水從(cong) 冰箱中取出,室溫避光放置15分鍾,然
後用涼水邊衝(chong) 邊搖勻快速解凍。
2、將化開的單克隆抗體(ti) 腹水12000RPM 4-37℃離心10-20分鍾。
3、先吸棄zui上麵浮沫和油脂,然後將上清轉出到另一個(ge) 幹淨容器或離心管;按每1毫升單克隆抗體(ti) 腹水加入純化液A 1.3毫升,室溫避光倒轉20分。
4、8000RPM 4-37℃離心10-20分鍾,沉澱用純化液B溶解到原單克隆抗體(ti) 腹水1/2體(ti) 積;再按每毫升加入純化液C 1.2毫升,室溫避光倒轉10分鍾。
5、8000RPM 4-37℃離心10-20分鍾,棄沉澱收集上清;每1.1毫升上清液加純化液D 1.2毫升,室溫避光倒轉20分鍾。
6、8000RPM 4-37℃離心10-20分鍾,收集沉澱用純化液B收集溶解沉澱到原單克隆抗體(ti) 腹水體(ti) 積的1/2。
7、透析袋用PBST浸泡3-5分鍾,然後用手揉捏數次,自來水衝(chong) 淨後接純水衝(chong) 洗幹淨,將純化好的抗體(ti) 放入用透析夾或繩紮緊。
8、透析液用純水稀釋30倍,將要透析的抗體(ti) 袋子放入。抗體(ti) 體(ti) 積:透析液體(ti) 積=1:50,4℃攪拌透析每次1小時,共3-4次。
9、8000RPM 4-37℃離心10-20分鍾,收集上清測蛋白濃度並調控在5mg/ml左右zui後加10/萬(wan) NaN3防腐並除菌過濾4℃備用。
注意事項:
1、溶血和腐敗的腹水不得用於(yu) 純化(血性腹水離心後除去紅細胞等可正常純化)。
2、離心溫度不要超過37℃。
3、操作和量取試劑要細致。
4、不攪拌透析每次時間不得低於(yu) 2小時。