GENOMIC試劑盒之大鼠Ⅰ型膠原蛋白對骨髓間充質幹細胞作用

       ky体育亚洲杯生物實驗室，通過ELISA實驗探討體(ti) 外條件下分離、純化大鼠骨髓間充質幹細胞的有效方法,對所獲細胞進行培養(yang) ,觀察細胞的生物學特性，以及用GENOMIC試劑盒檢測Ⅰ型膠原蛋白含量對骨髓間充質幹細胞成骨分化的作用。

        此方法實驗由實驗室的王主任和張研究院負責進行。首先采用密度梯度離心法分離大鼠骨髓間充質幹細胞,用貼壁培養(yang) 法對所獲細胞進行培養(yang) 、傳(chuan) 代、純化和擴增,觀察細胞的生物學特性,倒置相差顯微鏡觀察細胞的形態學特征,透射電鏡觀察細胞的超微結構,流式細胞術鑒定細胞表麵標誌物;將分離純化的大鼠骨髓間充質幹細胞培養(yang) 於(yu) Ⅰ型膠原蛋白上麵,對細胞的堿性磷酸酶表達、細胞礦化形成鈣化結節的能力進行測定。 結果分離的細胞1天後*貼壁,貼壁的細胞平均10d後形成細胞克隆,所獲細胞形態均一,呈成纖維細胞樣生長,細胞穩定表達骨髓間充質幹細胞表麵標誌物。在Ⅰ型膠原蛋白上麵培養(yang) 後,細胞堿性磷酸酶顯著表達,Von.Kossa染色可見礦化結節形成。

      結論密度梯度離心法分離,貼壁培養(yang) 法培養(yang) 所得細胞,可以有效分離、純化大鼠骨髓間充質幹細胞。用此種方法獲得的細胞具有骨髓間充質幹細胞的特性。Ⅰ型膠原蛋白能夠促進大鼠骨髓間充質幹細胞的成骨分化。