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GENOMIC大鼠S100B蛋白ky体育在线登陆介紹

更新時間:2014-07-28      瀏覽次數:1097

  

GENOMIC試劑盒,全部采用完整德國生物試劑工藝,*的抗體(ti) 生物試劑的具有高靈敏度,重複性好的ky体育在线登陆。自從(cong) 問世以來,深受廣大科研用戶的好評。

    下麵為(wei) 大家介紹一下,GENOMIC品牌的大鼠S100B蛋白ky体育在线登陆:

本試劑盒用於(yu) 測定大鼠血清、血漿及相關(guan) 液體(ti) 樣本中S100B蛋白(S-100B)含量

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體(ti) 夾心法測定標本大鼠S100B蛋白(S-100B)水平。用純化的大鼠S100B蛋白(S-100B)抗體(ti) 包被微孔板,製成固相抗體(ti) ,往包被單抗的微孔中依次加入S100B蛋白(S-100B),再與(yu) HRP標記的S100B蛋白(S-100B)抗體(ti) 結合,形成抗體(ti) -抗原-酶標抗體(ti) 複合物,經過*洗滌後底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的S100B蛋白(S-100B)呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品大鼠S100B蛋白(S-100B)濃度。 

試劑盒組成 

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

6ml×1瓶

2

酶標試劑

6ml×1瓶

8

標準品(240 ng/L

0.5ml×1瓶

3

標包被

12孔×8條

9

標準品稀釋液

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1瓶

10

說明書(shu)

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張  

6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個(ge)

標本要求

1.標本采集後盡早進行提取,提取按相關(guan) 文獻進行,提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放於(yu) -20℃保存,但避免反複凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑製辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

  1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

120 ng/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

60 ng/L

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

30 ng/L

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

15 ng/L

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

7.5 ng/L

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

 

  1. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其餘各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然後再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加於酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻
  2. 溫育:用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。   
  3. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用
  4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩幹,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,如此重複5次,拍幹。
  5. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
  6. 溫育:操作同3。
  7. 洗滌:操作同5。
  8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鍾.
  9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)

計算

  以標準物的濃度為(wei) 橫坐標,OD值為(wei) 縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與(yu) OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為(wei) 樣品的實際濃度。 

 

 

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