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大鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)ky体育在线登陆 檢測樣本有哪些,*

更新時間:2014-04-20      瀏覽次數:1273

大鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)ky体育在线登陆

 

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1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

8 nmol/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液

4 nmol/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

2 nmol/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

1 nmol/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

0.5 nmol/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

 

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其餘(yu) 各步操作相同)、標準孔、

待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,

然後再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為(wei) 5 倍)。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部,盡

量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板後置37℃溫育30 分鍾。

4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋後備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體(ti) ,甩幹,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒後棄去,如此重複5 次,拍幹。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

10 分鍾.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液後15 分鍾以內(nei) 進行。

 

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【注意事項】

1.包被板須密封防潮。從(cong) 冷藏環境中取出時,應平衡至室溫後,方可開封啟用。未使用完的板條應即時放回有幹燥劑的自封袋中,4℃密封保存。

2.滴加試劑前應將滴瓶輕搖、混勻,首滴棄去;滴加試劑時瓶身應保持豎直。

3.瓶蓋每次使用後要蓋緊,各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。

4.孵育時,推薦使用水浴箱。如無水浴箱,可取密封濕盒放入37℃溫箱內(nei) 使用。

5.用棄的試劑盒及樣本都應按汙染物妥善處理。試劑盒內(nei) 終止液有腐蝕性,須小心使用。

 

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