大鼠睾酮（T）ky体育在线登陆樣本中含有*怎麽辦

問：我之前定購了大鼠睾酮(T)ky体育在线登陆，檢測血清的。我現在想再訂購一盒，用於(yu) 檢測細胞，可以嗎？

答：大鼠睾酮(T)ky体育在线登陆可以檢測大鼠血清，血漿，細胞上清液，細胞裂解液等樣本。

問：如果我的樣本裏麵含有*，可以檢測嗎。

答：疊氮鈉會(hui) 影響HRP的活性，對整體(ti) 檢測有幹擾，不適合ELISA方法了。
   一般細胞裂解液不可能含有疊氮鈉，但如果樣本中含有疊氮鈉，不能做ELISA實驗的，如果要用elisa檢測 就隻能重新裂解

問：那細胞裂解方法是怎麽(me) 樣的呢，加入什麽(me) 試劑？

答：1. 融解RIPA裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數分鍾內(nei) 加入PMSF，使PMSF的zui終濃度為(wei) 1mM。

2. 對於(yu) 貼壁細胞：去除培養(yang) 液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yang) 液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有幹擾，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2秒後，細胞就會(hui) 被裂解。

對於(yu) 懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解後應沒有明顯的細胞沉澱。如果細胞量較多，必需分裝成50-100萬(wan) 細胞/管，然後再裂解。

3. 充分裂解後，10000-14000g離心3-5分鍾，取上清，即可進行後續的PAGE、Western和免疫沉澱等操作。

裂解液用量說明：通常6孔板每孔細胞加入150微升裂解液已經足夠，但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到200微升或250微升。